AMPK的相关蛋白激酶5抗体的实验步骤

AMPK的相关蛋白激酶5抗体的实验步骤:

一、准备好试剂与仪器:

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。

保存条件：不使用时取试剂盒中一抗保存-20℃，其他均保存 2-8 ℃

试剂盒特点：利用LAB-SA第二代技术生产的免疫组化检测试剂，特点是高灵敏度，特异性强、定性定位准确、背景清晰等、低倍景染色，直接滴加，操作方便，孵育时间短，适用于冷冻切片、石蜡切片及固定的细胞涂片。可用于检测细胞、组织内的特异性抗原。