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通用型PCR检测试剂盒的使用及效果

更新时间:2022-05-16      点击次数:380
       通用型PCR检测试剂盒利用离心柱内硅基质膜提取RNA,在反转录酶的作用下,以RNA为模板,以引物为起点合成与RNA模板互补的cDNA链。在TaqDNA聚合酶的作用下,经高温变性、低温退火、中温延伸的循环。
  特点:
  1.使用改良型PCR染料,与荧光PCR兼容,此染料功能类似溴酚蓝,扩增结束后无需添加上样液及电泳指示染料即可直接电泳检测。
  2.将Mg2+与含TaqDNA聚合酶的Mix分开,更加稳定。
  3.Mix中有一定比例的非Taq酶,扩增长片段的效率和灵敏度更高。
  4.方便,用户只需准备模板和引物既可以进行PCR实验。
  5.快捷,操作步骤已经限度地简化,能减少污染,降低实验误差。
  6.产物可直接用于T载体克隆,不需要额外的加A反应。
  7.染料单独提供,方便客户组合。
  通用型PCR检测试剂盒使用及效果:
  在无内毒素试管中,加入100uL细菌内毒素检查用水、内毒素标准溶液,或待测样品。再加入100uL鲎试剂溶液,混匀,37ºC温育T1分钟。温育结束,加入100uL显色基质溶液,混匀,37ºC温育T2分钟。温育结束,加入500uL偶氮化试剂1溶液,混匀,加入500uL偶氮化试剂2溶液,混匀加入500uL偶氮化试剂3溶液,混匀,静置5分钟,于545nm波长处读取吸光度值。
  内毒素标准范围(EU/mL)为0.01-0.1,T1为60分钟,T2为6分钟;内毒素标准范围(EU/mL)为0.1-1,T1为10分钟,T2为6分钟。

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