1.抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2.结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
3.酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
4.受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
5.此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
6.加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。
IL-1 elisa试剂盒的温浴:
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
IL-1 elisa试剂盒的洗涤:
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或抗体结合的物质以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。