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兔子elisa试剂盒使用时的基本操作步骤

更新时间:2024-05-06      点击次数:484
  兔子ELISA(酶联免疫吸附测定)试剂盒是一种用于检测和量化特定抗原或抗体在样本中的含量的分析工具。这种类型的试剂盒利用了酶联免疫吸附测定技术,该技术以其高灵敏度、特异性和方便性而广泛应用于生物医学研究、临床诊断以及食品安全等领域。

 

  ELISA技术基于抗原-抗体的特异性结合反应。在这种反应中,特定的抗体被固定到微孔板上,然后加入含有待测抗原的样本。如果样本中含有目标抗原,它们会与固定在板上的抗体结合。之后添加与抗原结合的酶标记二抗,形成抗体-抗原-酶标二抗复合物。通过添加底物进行显色反应,酶将底物转化为有色产物,其颜色的深浅与样本中抗原的浓度成正比。使用分光光度计读取结果后,可以通过标准曲线确定样本中抗原的精确量。
  兔子elisa试剂盒设备组成:
  1.包被板:通常是96孔的微孔板,其内表面被涂覆以捕获抗体。
  2.标准品:已知浓度的抗原溶液,用于构建标准曲线。
  3.样品稀释液:用于稀释样本以减少基质效应和非特异性结合。
  4.洗涤缓冲液:用于洗涤微孔板,以去除未结合的物质。
  5.酶标记二抗:针对目标抗原的特异性抗体,与酶连接,用于信号放大。
  6.底物溶液:用于显色反应,通常为TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)或OPD(邻苯二酚)。
  7.终止液:用于停止底物的反应,使颜色稳定,便于读数。
  8.封板膜:用于覆盖微孔板,防止液体蒸发和污染。
  9.说明书:提供详细的实验步骤、数据解释和安全信息。
  使用兔子elisa试剂盒的基本步骤包括:
  1.准备样本:根据说明书要求收集和处理样本。
  2.加样:向包被板的每个孔中加入标准品或稀释后的样本。
  3.孵育:将板子在适当的温度下孵育一定时间,让抗原与抗体结合。
  4.洗涤:倒掉孔内液体并用洗涤缓冲液清洗,以去除未结合物质。
  5.加入二抗:加入酶标记的二抗并再次孵育,允许其与结合的抗原反应。
  6.再次洗涤:重复洗涤步骤以清除未结合的二抗。
  7.加入底物:加入底物溶液并在暗处孵育,使其产生颜色变化。
  8.加入终止液:添加终止液后,颜色变化停止,此时立即用分光光度计读取吸光值。
  9.数据分析:根据标准曲线计算样本中抗原的浓度。

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