样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到
100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
rEPC,大鼠内皮祖细胞-骨髓
RN-c, 大鼠皮质神经元
RN-s, 大鼠纹状体神经元
RSC, 大鼠雪旺细胞
RA, 大鼠星形胶质细胞
RLF, 大鼠淋巴成纤维细胞
rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞
rCSC, 大鼠心肌细胞
RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞
RLFs, 大鼠肺成纤维细胞
rCF, 大鼠心脏成纤维细胞
MN-h, 小鼠海马神经元
MN-s, 小鼠纹状体神经元
mOPC, 小鼠少突胶质前体细胞
MA, 小鼠星形胶质细胞
MLF, 小鼠淋巴成纤维细胞
mRTEC, 小鼠肾小管上皮细胞
CSC, 小鼠心肌细胞
小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)
MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞
MM, 小鼠小胶质细胞
mCF, 小鼠心脏成纤维细胞
MN-c, 小鼠皮质神经元
细胞名称
人绒毛膜毛细血管内皮细胞
人羊膜上皮细胞
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