咨询热线

13928144929

当前位置:首页  >  技术文章  >  猪托克特诺病毒PCR检测试剂盒反应五要素

猪托克特诺病毒PCR检测试剂盒反应五要素

更新时间:2021-10-20      点击次数:471

反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免212个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

干扰素诱导蛋白AIM2抗体

水通道蛋白-2抗体

肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体

ADP核糖基化因子样11抗体

ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体

ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体

ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体

自噬相关蛋白10抗体

酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体

氨基酰化酶1抗体

脂肪甘油三酯脂酶抗体

磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体

双调蛋白(结肠直肠细胞源性生长因子)抗体

磷酸化水通道蛋白2抗体

粘附相关激酶抗体

磷酸化粘附相关激酶抗体

磷酸化蛋白激酶B抗体

磷酸化水通道蛋白2抗体

磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

磷酸化蛋白激酶B抗体

磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体

磷酸化活化转录因子4抗体

磷酸化雄激素受体抗体

磷酸化雄激素受体抗体

磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗体


联系我们

上海帛科生物技术有限公司 公司地址:上海嘉定区嘉罗公路1661 号062栋   技术支持:

扫一扫 更多精彩

微信二维码

网站二维码