准备试剂与收集血样:
双重核酸试剂盒(荧光PCR法) 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:5284个月
人APP-PS1双基因转染CHO细胞株;7WPS1
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21
中国仓鼠卵巢细胞-二氢叶酸还原酶缺陷型;CHO/dhFr-
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21
中国仓鼠肺细胞;CHL
中国仓鼠卵巢细胞;CHO
二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-
中国仓鼠肺细胞;R 1610 [R1610]
中国仓鼠肺细胞;V79
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1
仓鼠卵巢细胞;Lec1
中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21
中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1
二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-C
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E1
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-p7
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS3
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4A
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4B
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A
中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36
叙利亚仓鼠细胞系;Syrian Hamster AV12
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6
中国仓鼠卵巢细胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfr
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)
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