SETD7试剂盒​检测程序

检测程序：

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品（已激活） 100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。

3. 每孔中加入第一抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4. 洗板：同前。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

6. 洗板：同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。

8. 每孔加入100ul 终止液混匀。

9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

结果计算与判断

1. 所有 OD 值都应减除空白值后再行计算。

2. 以标准品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 为横坐标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上作图，画出标准曲线。

3. 根据样品 OD 值在该曲线图上查出相应 E2F1 含量 ，再乘上稀释倍数即可 。

试剂盒性能

1. 灵敏度 ： 最小的E2F1 检测浓度小于 15 pg/ml。

2. 特异性： 可同时检测重组或天然的人 E2F1 。 不与 人其它细胞因子有交叉反应。

3. 重复性：板内、板见变异系数均小于8.9％。

小鼠肝癌细胞；Hepa 1-6 [Hepa1-6]

小鼠肥大细胞瘤细胞；P815

小鼠胚胎成纤维细胞；3T6-Swiss albino

小鼠胚胎成纤维细胞；C3H 10T1/2 2A6

小鼠树突状细胞肉瘤细胞；DCS

小鼠淋巴瘤细胞；EL4

小鼠前胃癌细胞；MFC

小鼠单核巨噬细胞白血病细胞；RAW 264.7 [RAW264.7

小鼠胚胎成纤维细胞；3T3-L1

小鼠乳腺癌细胞；CCC-Ca761-03

小鼠胚胎成纤维细胞；BALB/C 3T3

小鼠淋巴细胞白血病；L1210

小鼠肺腺癌细胞系；LA795

C3H/An小鼠结缔组织细胞（L929-TK-）；LTK-

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞；SH2

小鼠B淋巴细胞杂交瘤细胞；SH3

仓鼠/小鼠杂交瘤细胞；145-2C11

小鼠黑色素瘤细胞；B16

小鼠T淋巴细胞；Cl.Ly1+2-/9

小鼠单核巨噬细胞；J774A.1

小鼠肾集合管细胞(SV40转化)；M-1

绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞；MFC-GFP

小鼠肾足细胞；Mouse podocyte

小鼠淋巴瘤细胞；P388D1(IL-1)

小鼠子宫颈癌细胞；U14

绿色荧光蛋白标记小鼠子宫颈癌细胞；U14-GFP

小鼠浆细胞瘤；MPC-11

小鼠胚胎成纤维细胞；PA317