操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在、第二孔中分别加标准品100μl,然后在、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品*终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
Aurora A+B+C有丝分裂激酶A/B/C抗体
phospho-ALK (Tyr1278 + Tyr1282 + Tyr1283)磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体
phospho-arfaptin 2 (Ser260)磷酸化ADP核糖基化因子结合蛋白2抗体
Phospho-Aurora B (Thr232) + Aurora C (Thr198)磷酸化有丝分裂激酶B/C抗体
phospho-Acinus (Ser1180)磷酸化腺泡Acinus蛋白抗体
phospho-ADRB2 (Ser346)磷酸化肾上腺素能受体β2抗体
APSAPS抗体
ACVRL1激活素受体样激酶1抗体
ACVR1B激活素A受体1B抗体
phospho-Androgen Receptor (Ser597)磷酸化雄激素受体抗体
phospho-A Raf (Ser214)磷酸化A-Raf抗体
ASAH2酰基鞘氨醇脱酰酶2抗体
ASAM脂肪细胞特异性粘附分子抗体
AAV5 capsid VP2 protein腺相关病毒5抗体
AMPK gamma 3腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗体
AMPK beta 2腺苷单磷酸活化蛋白激酶β2抗体
phospho-APC1 (Ser355)磷酸化细胞周期末期促进复合蛋白APC1抗体
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