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莽草酸脱氢酶(SD)测试盒微量法

简要描述:莽草酸脱氢酶(SD)测试盒微量法公司正在出售的产品:LIA琼脂进口、国产Lysine Iron Agar250克食品中生化试验动力鸟进口、国产MIO Medium250克动力、和鸟试验D-E中和肉汤进口、国产E Neutralizing Broth250克经防腐剂或消毒剂处理的样品增菌培养D-E中性琼脂进口、国产E Neutralizing Agar250克卫生环境中微生物的分离培养, 消毒效果测

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-13
  • 访  问  量:416

详细介绍

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,196个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

莽草酸脱氢酶(SD)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6953

商品介绍:

测定意义:

莽草酸途径是存在于植物、真菌和微生物中的一条重要的代谢途径,莽草酸脱氢酶是莽草酸合成途径中的关键酶。

测定原理:

莽草酸脱氢酶催化莽草酸和NADP产生NADPH,检测340nm下的吸光值增加速率来表示SD活性。

需自备的仪器和用品:

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约38个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

2 ug pET-28a(+) pET-28a(+) 低温运输,-20℃保存

GVPC琼脂基础 GVPC Agar Base 100g

1瓶 7WCY1.0细胞株 7WCY1.0 低温运输和保存

38个 0.5mLDNA超滤离心管(150-250KD)  

250mg Poly(I).Poly(C) 本产品是双链多聚脱氧核糖核苷酸,一条链是I,一条链是C,为冻干粉状态,加水或TE缓冲液即可溶解,可用于诱导动物产生干扰素,还可以用于在EMSA中作为非特异性的竞争剂。 Poly(I).Poly(C)

250mL MES Buffer,1.0M,pH8.5   MES Buffer,1.0M,pH8.5   常温保存

100次 植物种属鉴定PCR Mix 8(质体 rpoC1) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pMAL-p5E pMAL-p5E 低温运输,-20℃保存

双水解(绿脓杆菌)  20支

1瓶 RKO-AS45-1细胞株 RKO-AS45-1 低温运输和保存

液体双抗增菌液 Liquid Double Anti Bacteria 250g

莽草酸脱氢酶(SD)测试盒微量法Donkey Anti-Guinea pig IgG/AP  碱性磷酸(AP)标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlZnT-1  锌转运蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Jun B  活化蛋白激B抗体 规格: 0.1mlCCDC5  卷曲螺旋结构域蛋白5抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/FITC  FITC标记的兔抗牛IgM 规格: 0.3mlRab27a  RAM-11抗体 规格: 0.2ml

C4orf14  4号染色体开放阅读框14抗体 规格: 0.2mlglypican 3/GPC3  磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗体 规格: 0.1ml

phospho-IKK gamma (Ser376)  磷酸化KB抑制蛋白激γ抗体 规格: 0.1mlLGI1/ETL1  富含亮胶质瘤失活蛋白1抗体 规格: 0.1ml

CARD15  凋亡加强结构域蛋白15抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-Goat IgG/Cy7  Cy7标记的驴抗羊IgG 规格: 0.1ml

CPI17 alpha  蛋酸激PKC/CPI-17抗体 规格: 0.1ml

FECH/Ferrochelatase  铁螯合抗体 规格: 0.2ml

CDCA5/Sororin  细胞分裂周期相关蛋白5抗体 规格: 0.2ml

Phospho-HER2(Tyr1112)  磷酸化HER2受体抗体 规格: 0.1ml

Metal ion transporter  拟南介金属离子转运蛋白抗体 规格: 0.2ml

AMN1  细胞核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体 规格: 0.2ml

 


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