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亚铁氧化酶(HP)测试盒微量法

简要描述:亚铁氧化酶(HP)测试盒微量法公司正在出售的产品:安德雷德氏糖类肉汤进口、国产Andrade,s Carbohydrate Broth250克细菌的糖发酵试验OF进口、国产HLGB250克细菌的氧化发酵试验EYA基础进口、国产Egg Yolk Agar Medium Base250克肉毒梭菌、产气荚膜梭菌的分离培养强化梭菌鉴别琼脂进口、国产DRCA250克食品和其他物质中梭菌的计数和培养

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-13
  • 访  问  量:356

详细介绍

商品介绍:

测定意义:

Hephaestin (HP)作为铜蓝蛋白的同系物,是近年来发现的铁转运蛋白亚铁氧化酶,HP属亚铁氧化酶家族成员,具有亚铁氧化酶的活性,参与体内铁代谢。HP的表达可受铁、铜及锌等金属离子的调节。HP催化Fe2+氧化生成Fe3+,在介导铁的跨膜转运中有重要作用。

测定原理:

HP催化Fe2+氧化为Fe3+Fe2+ferrozine反应显色,在560 nm下有特征吸光值。通过测定Fe2+的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性。

自备用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,3703个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

亚铁氧化酶(HP)测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6957

11.png 

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约970个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

250mL Zinc-Fixative  Zinc-Fixative  常温保存

10mL 去垢剂去除树脂 Detergent Erasol Resin 常温保存

2 ug pVL1392 pVL1392 低温运输,-20℃保存

500次 一管式植物DNAout One-Tube Plant DNAOUT 常温

2 ug pET-3d pET-3d 低温运输,-20℃保存

10mL RNase-free 水 RNase-free Water 常温

1瓶 95-D细胞株 95-D 低温运输和保存

50T 猪瘟病毒RT-PCR试剂盒 Classical Swine Fever Virus RT-PCR Kit 低温运输,-20℃保存

25 T 超微量ATP测试盒(测Ca2+ATPase) Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

50mL Lithium Chloride Solution(氯化锂溶液),1M  Lithium Chloride Solution,1M  常温保存

50次 通用型RT-LAMP试剂盒 Universal RT-LAMP Kit -20℃保存

亚铁氧化酶(HP)测试盒微量法Myt1  髓鞘转录因子1抗体 规格: 0.2ml

THYN1  胸细胞核蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Hexokinase 3  己糖激3抗体 规格: 0.2ml

TSSC3  瘤抑制转移候选基因3抗体 规格: 0.2ml

EGF  小鼠抗表皮生因子抗体 0.1ml

Septin 2/Sept2/NEDD5  神经前体细胞表达发育下调蛋白5抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Cy5  Cy5标记的兔抗羊IgG 规格: 0.1ml

Neurexin 1  轴突蛋白1(Neurexin 1α)抗体 规格: 0.2ml

CD141/THBD  凝调节蛋白/栓调节素抗体 规格: 0.1ml

Collagen XI alpha 2  胶原蛋白11A2抗体 规格: 0.2ml

PSD95  突触后密度蛋白95抗体 规格: 0.1ml

phospho-NTRK2/TrkB (Tyr515)  磷酸化酪激B抗体 规格: 0.1ml

 


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