腺病毒通用PCR检测试剂盒厂家

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

非洲防己碱;Columbamine CAS 3621-36-1 *  规格： 20mg

二氢醉椒苫素 ;dihydrometh CAS 19902-91-1 *  规格： 10mg

DL-丁香树脂酚;DL-Syringar CAS 1177-14-6 *  规格： 10mg

大黄酸;Rhein CAS 478-43-3 *  规格： 20mg

次黄嘌呤;6-Hydroxypurine CAS 68-94-0 *  规格： 20mg

刺芒柄花素;Formonetin CAS 485-72-3 *  规格： 20mg

;Phenylacetic aci CAS 103-82-2 *  规格： 20mg

表儿茶素;L-Epicatechin CAS 490-46-0 *  规格： 20mg

磺胺噻唑;纯品型;标准品;有证书 CAS 72-14-0 *  规格： 0.25g

解喹;纯品型;标准品;有证书 CAS 99607-70-2 *  规格： 0.1g

草定;纯品型;标准品;有证书 CAS 97886-45-8 *  规格： 0.1g

;纯品型;标准品;有证书 CAS  *  规格： 0.1g

硝胺;纯品型;标准品;有证书 CAS 99-30-9 *  规格： 0.1g

芸苔素内酯;纯品型;标准品;有证书 CAS 72962-43-7 *  规格： 0.1g

吡丙;纯品型;标准品;有证书 CAS 95737-68-1 *  规格： 0.1g

腺病毒通用PCR检测试剂盒厂家二氢尿嘧  114.1  Two hydrogen uracil*：504-07-4分子量： C4H6N2O2

4-苄-2-氯甲啡啉  225.71  4- -2- benzyl chloromethyl morpholine*：40987-25-5分子量： C12H16ClNO

乙酰丙酮钴(II)  356.26  Cobalt (II)*：14024-48-7分子量： C15H21CoO6

3-氟-4-吡甲醛  125.1  3- -4- pyridine formaldehyde*：40273-47-0分子量： C6H4FNO

乙胺嘧  248.71  The*：58-14-0分子量： C12H13ClN4

硫代米氏酮  TMK  284.42分子量： C17H20N2S*：1226-46-6

4-氯吡氮氧物  129.55  4- chloride pyridine nitrogen oxide*：1121-76-2分子量： C5H4ClNO

3-甲-4-硝吡唑  127.1  3- methyl -4-*：5334-39-4分子量： C4H5N3O2

2,3-二氟溴  192.99  2,3- two fluorine bromine*：38573-88-5分子量： C6H3BrF2

间三联  230.3  Between three*：33763分子量： C18H14

5-[4-(三氟甲)]-1H-四唑  214.15  5-[4- (three)]-1H- four*：2251-79-8分子量： C8H5F3N4

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。