洋葱伯克氏菌PCR检测试剂盒规格

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

原理是由一对引物介导，能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增，经过n个热循环扩增，扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0＜E＜1,扩增效率＝倍，使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

林 CAS 5250-39-5 *  规格： 100mg

多潘立 CAS  *  规格： 100mg

表没食子儿茶素没食子酸酯 CAS 989-51-5 *  规格： 20mg

谷氨酸 CAS  *  规格： 50mg

对 CAS  *  规格： 100mg

甲氧苄啶 CAS  *  规格： 100mg

甘草次酸 CAS 1449-05-4 *  规格： 20mg

茵陈（茵陈蒿） CAS  *  规格： 1.5g

环丙星 CAS 93107-08-5 *  规格： 100mg

川乌 CAS  *  规格： 0.5g

瑞香素 CAS  *  规格： 约20mg/支

硝苯地平杂质B CAS  *  规格： 30mg

绒毛龙芽草 CAS  *  规格： 2g

牛膝 CAS  *  规格： 1g

黏质雷氏菌 CAS  *  规格： 冻干粉

洋葱伯克氏菌PCR检测试剂盒规格1-溴-4-(*硅)  229.19  1- -4- (three methyl silicone) benzene*：1862439分子量： C9H13BrSi

5-溴-2-氟甲  189.02  5- -2- fluoride*：51437-00-4分子量： C7H6BrF

酪里达唑  333.45  Cheese with Trinidad*：74772-77-3分子量： C18H23NO3S

2-氯-5-甲  252.48  2- chloride -5-*：116632-41-8分子量： C7H6ClI

4-溴-4'-正庚联  331.29  4- bromo -4'- n-heptanoic biphenyl*：58573-93-6分子量： C19H23Br

6,6'-二溴-2,2'-联吡  313.98  6,6'- dibromo -2,2'- bipyridine*：49669-22-9分子量： C10H6Br2N2

苏丹红197  Tonyred 197  381.44分子量： C23H19N5O*：52372-39-1

二硫钼  160.07  Molybdenum disulfide*：1317-33-5分子量： MoS2

氯代3,6-二-10-甲吖  259.73  Two amino -10- chloro 3,6- methylacridine*：86-40-8分子量： C14H14ClN3

(S,S)-(-)-2,2'-异亚丙双(4-叔丁-2-恶唑啉)  294.44  (S, S) - (-) -2,2'- isopropylidenebis (4- tert butyl -2- oxazolinyl)*：131833-93-7分子量： C17H30N2O2

5-甲氧-2-甲并硒唑  226.14  5- methyl group -2- methyl benzene and selenium*：2946-17-0分子量： C9H9NOSe

技术原理：
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链，在DNA聚合酶与启动子的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现，DNA在高温时也可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。因此，通过温度变化控制DNA的变性和复性，并设计引物做启动子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。（ DNA高温变性低温复性）
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义，该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活，不需要每个循环加酶，使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本，PCR技术得以大量应用，并逐步应用于临床。