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PCR扩增试剂盒

简要描述:PCR扩增试剂盒理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。

  • 产品型号:50次
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-17
  • 访  问  量:1127

详细介绍

PCR扩增试剂盒原理是由一对引物介导,能在动植物体外对特定基因(DNA)片断进行快速酶促扩增,经过n个热循环扩增,扩增产物中所含特定基因数是原始模板数的(1+E)n(0<E<1,扩增效率=倍,使得检测扩增产物中的特定基因成为可能。
 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;

注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

产品名称

规格

货号

 PCR扩增试剂盒

 50次

BK-P9541

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实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

技术原理:
 DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解链成单链,在DNA聚合酶与启动子的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子挎贝。
       在聚合酶链式反应实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,并设计引物做启动子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的体外复制。( DNA高温变性低温复性)
       发现耐热DNA聚合同酶--Taq酶对于PCR的应用有里程碑的意义,该酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷、同时也大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。

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Ras样蛋白A+B抗体 规格: 0.2ml  英文名称:RALA+RALB

视网膜感光细胞外节膜蛋白1抗体 规格: 0.2ml  英文名称:ROM1

RAS相关GTP结合蛋白A抗体 规格: 0.2ml  英文名称:RRAGA

环指蛋白32抗体 规格: 0.2ml  英文名称:RNF32

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磷酸化原癌基因c-Raf抗体 规格: 0.1ml  英文名称:phospho-c-Raf (Ser259)

沉默调节蛋白1抗体 规格: 0.1ml  英文名称:SIRT1

磷酸化核基质结合区结合蛋白1抗体 规格: 0.1ml  英文名称:Phospho-SATB1 (Ser47)

上皮特异性ETs转录因子抗体 规格: 0.1ml  英文名称:SPDEF

线粒体二羧酸载体蛋白抗体 规格: 0.2ml  英文名称:SLC25A10

先心病相关蛋白TBX1抗体 规格: 0.2ml  英文名称:TBX1

转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体 规格: 0.1ml  英文名称:TAB1

肿瘤蛋白P53诱导蛋白11抗体 规格: 0.2ml  英文名称:TP53I11

Toll样受体5抗体 规格: 0.1ml  英文名称:TLR5

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