5637（人膀胱癌细胞）

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

产品特点:
1、 使用方便:不需昂贵设备。
2、 可以处理各种细菌菌体，包括新鲜菌液和冰冻菌体。
3、 将蛋白提取的时间缩短至30分钟-1小时。
4、 采用温和的中性裂解组分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
6、 紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
7、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本试剂盒中不有EDTA，与金属螯和层析等兼容。

培养：
1.取出小鼠后沥干酒精，放入超净台内，固定在泡沫板上。
2.用镊子提起皮肤，用解剖剪剪开皮肤一个横切口，将皮肤向上撕开，然后剪开肌肉等，暴露出腹腔，在左侧找到脾脏，用弯头眼科镊取出脾脏，置于无菌培养皿中。
3.用生理盐水将取出的脾脏清洗多次，并剔除多余无用的组织。
4.将筛网置于平皿中，脾脏置于筛网上，用弯头镊镊住，轻轻在筛网上进行碾磨，同时不停滴加不含血清的培养液冲洗。
5.将碾磨好的细胞悬液吸入至离心管中，离心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。
6.加入10ml培养液，吹打混匀，取样计数。
7.将稀释好的细胞悬液分装于培养瓶中，轻轻摇晃混匀，在培养瓶上。
实验事项：
1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。  实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2.   加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品，酶结合物或底物时，前一个孔与后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不同的“预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)好控制在10分钟内，如标本数量多，推荐使用多道移液器加样。
3.   孵育：为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜，以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的孵育时间和温度。
4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响后的酶标仪读数。
5.  试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。请确配置标准品及工作液，尽量不要微量配置(如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl)，以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。
6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如，每隔10分钟)，如颜色较深，请提前加入终止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射。
    建议检测样品时均设双孔测定，以保证检测结果的准确性。
    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定，计算时请后乘以稀释倍数。

CD84 AIMP2抗体
CD7 乙酰胆碱酶抗体
TNFRSF10D 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
KLK13 防御素α1/3抗体
PIGR ABC膜转运蛋白抗体
PDGFRA 植物延长蛋白
IL3RA A-Raf抗体
CTLA4 磷酸化A-Raf抗体
MSR1 红细胞腺苷脱氨酶3抗体
CD14 雄激素结合蛋白抗体
HA 肝再生增强因子抗体
SERPING1 APP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体
METTL1 甲胎蛋白单克隆抗体
SELE 甲胎蛋白单克隆抗体
CR2 ADP核糖基化因子结合蛋白1抗体
CD55 芳香烃受体抗体
CD8A 吸引素抗体
ICAM3 腺苷三磷酸结合盒转运体A1抗体
CD3D 蛋白激酶B2
IL18R1 血管生成素2抗体
C1S 芳香化酶/细胞色素P450/雌激素合成酶抗体
VTN 腺苷A2A受体抗体
ECM1 蛋白激酶A锚定蛋白95抗体
TF 顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体
HA 去整合素样金属蛋白酶8抗体
HA 芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体
GAG-P24 ACN9蛋白抗体
TNFRSF1A 双链RNA腺苷酸脱氨基酶抗体
ENG 腺苷单磷酸活化蛋白激酶α2抗体
IL1R2 腺苷酸激酶抗体
IL17RA α2巨球蛋白样蛋白1抗体 α2ML1
APOH 细胞凋亡相关蛋白3抗体
CD40 肌动蛋白α/α-SMA/α Actin抗体
CD36 ATP结合蛋白家族7抗体
KLK11 ASCL2蛋白抗体
CD97 磷酸化脊髓小脑失调症蛋白1抗体
NTRK3 磷酸化活化转录因子1抗体
HA 磷酸化活化复制因子2抗体

自噬相关蛋白4A抗体 IGFBP-4 ELISA Kit
载脂蛋白A4抗体 IGFBP-3 ELISA Kit
12脂氧合酶抗体 IGFBP2 ELISA Kit
血管紧张素III抗体 IGFBP-1 ELISA Kit
腺苷酸环化酶3抗体 IGFBP-3 ELISA Kit
血管动蛋白抗体 IGFBP-2 ELISA Kit
腺病毒早期E1A蛋白抗体 IGFBP-1 ELISA Kit
磷酸化活化复制因子2抗体 IGF-2R ELISA Kit
磷酸化活化复制因子2抗体 IGF-2 ELISA Kit
磷酸化失调症蛋白1抗体 IGF2BP2 ELISA Kit
锚蛋白重复结构域蛋白17抗体 IGF-1 ELISA Kit
胞质乙醛脱氢酶1抗体 IRS-2 ELISA Kit
ADP核糖基化样因子ARL3抗体 IRS1 ELISA Kit
花生四烯酸15脂氧合酶1抗体 ISR-β ELISA Kit
乳腺癌增强蛋白2抗体 INSRA ELISA Kit
α1微球蛋白抗体 IGF-Ⅱ ELISA Kit
α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体 IGF-Ⅰ ELISA Kit
腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体 Anti-Ins ELISA Kit
AMPK的相关蛋白激酶5抗体 IDE ELISA Kit
致瘤磷蛋白32相关蛋白1抗体 INS ELISA Kit
腺苷脱氨酶抗体 IAPP ELISA Kit
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族4抗体 TAP ELISA Kit
ATRNL1蛋白抗体 Try-Ⅱ ELISA Kit
AFP4a蛋白抗体 trypsin ELISA Kit
铁蛋白Fe65样蛋白1抗体 CPAF ELISA Kit
铁蛋白Fe65样蛋白2抗体 HbCO ELISA Kit
β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体 NO ELISA Kit
早老素稳定因子样蛋白/γ分泌酶组件蛋白APH1抗体 NOS ELISA Kit
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体 NOS ELISA Kit
磷酸化蛋白激酶AKT1抗体 NO ELISA Kit
ASH1L蛋白抗体 FOLR1 ELISA Kit
α2C-AR肾上腺素能受体抗体 FOLR ELISA Kit
中心体蛋白AZI1抗体 FA ELISA Kit
5637(人膀胱癌细胞)α蛋白激酶3抗体 GSSG ELISA Kit
表皮型脂氧合酶3抗体 OxLDL ELISA Kit
锚蛋白重复域28抗体 Ox-HDL ELISA Kit
操作流程：
1.1主要试剂与仪器：倒置相差显微镜（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293细胞的复苏培养传代及冻存：
1.2.1 细胞的复苏培养 从液氮罐中取出冻存管,立即投入37℃水浴,并不断的摇动,使之迅速融化。 将溶解的细胞冻存管取出,用酒精消毒后打开,吸出溶有细胞的冻存液,加入事先装好培养液（37℃预热，8～10倍体积）离心管内,稍微吹打混匀,然后1000rpm 5min,去除上清,加入适量培养液,吹打成细胞悬液, 以1×105/ml密度接种于25cm2培养瓶内，在37℃、5％co2及饱和湿度下培养。
1.2.2 细胞传代 原代培养的hek－293细胞48h换液1次，细胞长至60%～70%融合时，用0.25%胰酶消化1～2min，将培养瓶再用手掌轻轻敲打使细胞脱壁、悬浮、分散，为使细胞进一步分散可用吹打管轻轻吹打几次，获得细胞悬液，然后加入倍量的培养基，温和混匀，吸管分装混合液，传代扩增细胞。
1.3 细胞形态的观察 在倒置显微镜下观察并记录细胞的生长情况及形态特征。
1.4 细胞的计数 常规消化细胞，待细胞变圆、脱壁并浮起，加入少量培养基离心，再用pbs重悬并吹打制成细胞悬液。在细胞计数板盖玻片的一侧加微量细胞悬液，用10×物镜观察计数板四角大方格细胞数，按公式计算出细胞数。细胞数/ml原液＝(四方格细胞数之和/4) ×104。
1.5 细胞的贴壁率 指数生长期的细胞，以0.25％胰酶消化成单细胞悬液，计数后分别接种于72个25cm2培养瓶中，每两小时随机取出3瓶细胞，吸除培养基及未贴壁细胞，加入胰消化酶消化、计数已贴壁细胞，取其平均值，按照公式：贴壁率(%)=(已贴壁细胞数/接种细胞数) ，计算贴壁率。 
1.6 生长曲线 取指数生长期的细胞用胰酶消化制成单细胞悬液，以1×104/孔接种于24孔板，每孔加入1ml培养基。每天随机取3孔，计数每孔细胞的数目并计算平均值。连续计数10d，绘制细胞生长曲线。