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果胶酶测试盒微量法

简要描述:2-Deacetyltaxuspine X公司其它产品MLF, 小鼠成纤维细胞外消旋N-去异丙嗪质量规格:美国进口rac N-Demethyl Promethazine
类成纤维细胞系;CNLMG-B5538SKIN 肝星形细胞*培养基 100mL异丙嗪亚砜质量规格:美国进口Promethazine Sulfoxide
视网膜色素上皮细胞RNAHRPEpiC miRNA5 μg4-羟基雷美替胺质

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-23
  • 访  问  量:469

详细介绍

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,029个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

果胶酶测试盒微量法

100管/48样

微量法

BK-01S7013

商品介绍:

测定意义:

果胶酶(pectinase)是一类分解果胶质酶类的总称,包括原果胶酶,果胶酯酶,多聚半乳糖醛酸酶和果胶裂解酶四大类,广泛存在于植物果实和微生物中,主要用于食品、酿酒、环保、医药、纺织及日化用品行业。

测定原理:

果胶酶水解果胶生成半乳糖醛酸,具有还原性醛基,与DNS试剂反应生成红棕色物质,在540nm有特征吸收峰,测定540nm处吸光值变化可计算得果胶酶活性。

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约08个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

25uL Cy5-dCTP溶液 (10 mM) Cy5-dCTP Solution -20℃保存

2 ug pIE1-neo pIE1-neo 低温运输,-20℃保存

碘伏(液体) Povidone-iodine (liquid) 500g

1瓶 Jurkat D细胞株 Jurkat D 低温运输和保存

基因工程大肠杆菌  

100µg T4 噬菌体基因 32 蛋白 T4 Gene 32 Protein -20℃保存

1%葡萄糖肉汤 1% Dextrose Broth Medium 250g

1 管 SMD1163酵母菌 X33 Yeast Strain -80℃保存

2 ug pSV-beta-gal pSV-beta-gal 低温运输,-20℃保存

200次 一管式病毒RNAout One-Tube Viral RNAOUT 4℃保存

2 ug pCMV-BD pCMV-BD 低温运输,-20℃保存

果胶酶测试盒微量法GGPS1  法尼基二磷酸合1抗体 规格: 0.2ml

caspase-3 p11  半胱天冬-3原抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗羊IgG 规格: 0.1ml

phospho-Tau protein(Ser416)  磷酸化微管相关蛋白抗体 规格: 0.1ml

MIP-1 Alpha  巨噬细胞症因子1α抗体 MIP-1α 规格: 0.1ml

DOCK1  细胞质分裂付出蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Influenza A virus (Duck)  鸭毒抗体 0.2ml

Collagen III  抗Ⅲ型胶原抗体 Collagen Ⅲ 规格: 0.1ml

PCDH20  原钙粘附蛋白20抗体 规格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗羊IgG 规格: 0.1ml

Bestrophin 3  卵黄状黄斑蛋白3抗体 规格: 0.2ml

 


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