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果胶甲酯化程度测试盒微量法

简要描述:果胶甲酯化程度测试盒微量法公司正在出售的产品:42℃生长进口、国产42℃ Growth Medium250克副溶血弧菌42℃生长试验水解酪蛋白琼脂进口、国产Casein Agar Medium250克用于鉴别蜡样芽孢杆菌分解酪蛋白试验葡萄糖铵进口、国产Ammonium Dextrose Medium250克志贺氏菌的葡萄糖铵试验葡萄糖半固体发酵管进口、国产Dextrose Semisolid Me

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-24
  • 访  问  量:898

详细介绍

实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,0369个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

果胶甲酯化程度测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S7011

商品介绍:

测定意义:

植物细胞壁中的果胶是植物初生细胞壁的主要成分,除了起结构支撑、物质运输等作用外,还具有抵抗逆境的作用。果胶甲酯化程度影响了细胞壁的坚韧程度及其抗性。

测定原理

果胶甲酯键经皂化处理后释放出甲醇,甲醇与2,4-戊二酮反应显色,在412nm下测定吸光值;同时半乳糖醛酸在70℃下与浓硫酸反应生成5-甲酰基-2-呋喃甲酸,5-甲酰基-2-呋喃甲酸与3,5-二甲基反应产生有色物质,在450nm下有最大吸光值。以甲醇生成量与半乳糖醛酸含量的比值代表果胶甲酯化程度。

自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、恒温水浴锅、蒸馏水、硫酸。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
11.png

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约943个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

2 ug pCMV-SPORT6 TMTC1 pCMV-SPORT6 TMTC1 低温运输,-20℃保存

HBI副溶血性弧菌生化鉴定条(新国标)  5条/盒

100g 聚乙烯吡咯烷酮 400-0625446Polyvinylpyrrolidone(PVP40000) 室温干燥保存

50T 溶藻弧菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

1 g L-Glutathione (reduced form)(抗氧化剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL EDTA Solution(EDTA溶液),0.5M,pH7.4  EDTA Solution,0.5M,pH7.4  常温保存

1.5mL 酵母tRNA溶液B(精提)(5mg/mL) Yeast tRNA Solution -20℃保存

2 ug pLenti6/V5-DEST pLenti6/V5-DEST 低温运输,-20℃保存

麦康凯琼脂3号 Maconkey Agar No.3 250g

1瓶 L7912细胞株 L7912 低温运输和保存

PPLO肉汤 PPLO Broth 250g

果胶甲酯化程度测试盒微量法IKK gamma/IKBKG  KB抑制蛋白激γ抗体 规格: 0.2mlphospho-CaMK2 alpha (Tyr231)  磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激2α抗体 规格: 0.1ml

GABRA3/GABA A Receptor alpha 3  G氨基丁酸受体α3抗体 规格: 0.2mlNIS  钠碘转运体蛋白抗体 规格: 0.2ml

DAT1/LIM domain only 3  神经细胞特异性转录因子DAT1抗体 规格: 0.2mlH1N1 Hemagglutinin 2  甲型毒凝素抗体 规格: 0.1ml

DAP1  死亡相关蛋白1抗体 规格: 0.2mlSGLT1/GLT 1  钠-糖共转运载体1抗体 规格: 0.1ml

human Fibrinogen Monoclonal  人纤维蛋白原单克隆抗体 规格: 0.2mlBPIL3  杀菌/通透性增加蛋白样3抗体 规格: 0.2ml

MIA2  黑色素瘤抑制活性蛋白2抗体 规格: 0.2mlCGA/ Chromogranin A  嗜铬粒素A抗体 规格: 0.1ml

ChRM2/Acetylcholine receptor(M2)  毒蕈碱型乙酰受体抗体 规格: 0.1mlCYP2E1  细胞色素P450ⅡE1抗体 规格: 0.1ml

NTF97/KPNB1  亲核素β1抗体 规格: 0.1mlATM  毛细管扩张性共济失调症突变蛋白抗体 规格: 0.1ml

Matriptase 2  膜型丝蛋白2抗体 规格: 0.2mlMEK1/2(MAPKK1)  丝裂原活化蛋白激激1抗体 规格: 0.1ml

LPAP  淋巴细胞磷蛋酸相关蛋白抗体 规格: 0.1mlERK2/MAPK1  丝裂原活化蛋白激1抗体 规格: 0.1ml

HRH4/GPCR105  组织胺H4受体抗体 规格: 0.1ml

COPS8  信号转导蛋白亚基8抗体 规格: 0.2ml

 


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