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葡萄糖6磷酸酶(G6P)测试盒微量法

简要描述:葡萄糖6磷酸酶(G6P)测试盒微量法公司正在出售的产品:UBA进口、国产UBA Medium250克啤酒中厌氧菌检测NBB琼脂进口、国产NBB Agar250克啤酒中厌氧菌检测乳酸菌选择性进口、国产Raka-Ray Medium250克啤酒中乳酸菌检测和分离培养乳酸菌选择性琼脂进口、国产LBS Agar250克用于乳酸杆菌的检测

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-24
  • 访  问  量:676

详细介绍

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:葡萄糖6磷酸酶(G6P)测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6974

产品分类:糖异生系列
商品介绍:

测定意义:

葡萄糖-6-磷酸酶((glucose 6 phosphataseG6PaseEC 3.1.3.9)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。

测定原理:

G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,变旋酶和葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NAD+还原生成NADH,在340nm下测定NADH生成速率,即可反映G6P活性。

需自备的仪器和用品:

分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

2 ug pGL3-control pGL3-control 低温运输,-20℃保存

肉汤D Broth medium D (Lactose monohydrate broth) 250g

1瓶 Hep G2[HepG2]细胞株 Hep G2[HepG2] 低温运输和保存

三糖铁(TSI)琼脂 TSI Agar 250g

0.032µg 肠激(轻链) Enterokinase,Light Chain -20℃保存

125mL RNase-Free TE Buffer(无RNase的TE缓冲液),20X,pH8.0   RNase-Free TE Buffer,20X,pH8.0   常温保存

1 管 K802大肠杆菌 K802 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRNAT-H1.1/Hygro pRNAT-H1.1/Hygro 低温运输,-20℃保存

24 T 乳酸脱氢测试盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

2 ug pcDNA3-CFP pcDNA3-CFP 低温运输,-20℃保存

察氏液体  250g

葡萄糖6磷酸酶(G6P)测试盒微量法Phospho-PRAS40 (Thr246)  磷酸化蛋白激AKT底物1抗体 规格: 0.1ml

DPP2  溶体丝蛋白DPP2抗体 规格: 0.1ml

CHK1/CHEK1  细胞周期检测点激1抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-rabbit IgG/Cy3  Cy3标记的小鼠抗兔IgG 规格: 0.1ml

phospho-ATRIP (Ser68+Ser72)  系统性红斑狼疮先关蛋白TREX1抗体 规格: 0.1ml

MUL1/RNF218  E3泛素连接MUL1抗体 规格: 0.2ml

phospho-ROCK2(Tyr256)  磷酸化Rho相关蛋白激2抗体 规格: 0.1ml

AHNAK2  AHNAK核蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Phospho-NFKB1(Ser903)  磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 规格: 0.1ml

E2EPF  泛素交联抗体 规格: 0.2ml

CADM3/IGSF4B  细胞粘附分子3抗体 规格: 0.2ml

Rabbit Anti-Bov IgG/RBITC  罗丹明标记的兔抗牛IgG  规格: 0.3ml 

 


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