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本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,44个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
单胺氧化酶(MAO)测试盒微量法 | 100管/96样 | 微量法 | BK-01S6931 |
商品介绍:
测定意义: MAO(EC1.4.3.4) 主要存在于脊椎动物的各种器官,特别是分泌腺、脑、肝脏,在无脊椎动物、豆类的芽等植物中也存在催化单胺类物质代谢,含量较低,具有重要的生理功能,其活性能反映肝纤维化的程度。此外,MAO活性异常导致细胞内单胺类神经递质运转出现紊乱,从而引发多种病症。 测定原理: MAO催化单胺类底物脱氨生成相应的醛,进一步氧化成酸;底物在360nm处有特征吸收峰,测定360nm光吸收下降的速率,计算MAO活性。 自备实验用品及仪器: 天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。 |
试剂组成和配制:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约66个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
2 ug pCMV-HA-C pCMV-HA-C 低温运输,-20℃保存
CCDA添加剂 CCDA Supplement 2ml*5支
250g 蛋白胨 Peptone 室温保存
50T 人黏附分子CD44基因PCRPCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
100μL Ac-DEVD-CHO(Caspase 3抑制剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Citrate Buffer(柠檬酸盐缓冲液),0.5M,pH5.0 Citrate Buffer,0.5M,pH5.0 常温保存
10次 DNA 5’末端标记试剂盒 DNA 5’ End-Labeling Kit -20℃保存
2 ug pHT304 pHT304 低温运输,-20℃保存
龙胆紫血液琼脂基础 Crystal violet blood agar base 250g
1瓶 JAR细胞株 JAR 低温运输和保存
无菌取样袋(带铁丝)(30cm*18cm) 419个/包*4
单胺氧化酶(MAO)测试盒微量法Streptavidin/SA protein 链亲和素抗体 0.1mlHSP58/Cornulin 热休克蛋白58抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的羊抗大鼠IgG 规格: 0.1mlMDFIC 肌原调节抑制蛋白抗体 规格: 0.2ml
SMS2/Sphingomyelin Synthase 2 鞘磷脂合成2抗体 规格: 0.2mlMCHR/GPR24 G蛋白偶联受体24抗体 规格: 0.1ml
Anthrax 抗体(采用活疫苗制备) 规格: 0.2mlRabbit Anti-pig IgG/Cy7 Cy7标记的兔抗猪IgG 规格: 0.1ml
GH/Growth Hormone 生激素抗体 规格: 0.1mlGRAMD2 GRAM结构域蛋白2抗体 规格: 0.2ml
phospho-CDKN1A/P21 (Thr145) 磷酸化p21蛋白抗体 规格: 0.1mlEphrin A5 酪蛋白激A5受体抗体 规格: 0.1ml
UBE2D4 泛素蛋白连接D4抗体 规格: 0.2mlAKIRIN1 AKIRIN1蛋白抗体 规格: 0.2ml
IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干扰素α11抗体 规格: 0.2mlGPVI/Glycoprotein VI 糖蛋白VI/六糖蛋白抗体 规格: 0.2ml
CCDC114 卷曲螺旋结构域蛋白114抗体 规格: 0.2mlADAMTS12 整合素样金属蛋白与凝1型-12抗体 0.2ml
CD133 antigen 造干细胞抗原CD133抗体 规格: 0.1mlDDX43/CT13 瘤/睾抗原13抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlNOC3L/FAD24 脂肪细胞分化因子24 规格: 0.2ml
phospho-RGS19(Tyr143) 磷酸化G蛋白信号转导调节因子19抗体 规格: 0.1mlFAM164B FAM164B蛋白抗体 规格: 0.2ml
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