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土壤脱氢酶(SDHA)测试盒可见分光光度法

简要描述:土壤脱氢酶(SDHA)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:BETA-SSA 琼脂进口、国产BETA-SSA Agar用于链球菌的选择性分离培养(ACUMEDIA方法)250改良Y 进口、国产Agar Y,Modified用于分离小肠结肠炎耶尔森氏菌 (GB标准)250改良盐缓冲液PSB 进口、国产Phosphate Saline Buffer,Modified用于小肠结肠炎耶尔森氏菌冷增

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-25
  • 访  问  量:543

详细介绍

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:土壤脱氢酶(SDHA)测试盒可见分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6844

产品分类:土壤系列
商品介绍:

测定意义:

土壤脱氢酶(Soil dehydrogenase, sDHA)的活性可以反映土壤体系内活性微生物量以及其对有机物的降解活性,可以作为土壤微生物的降解性能指标。

测定原理:

氢受体2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC)在细胞呼吸过程中接受氢以后,被还原为三苯基甲鐟(Triphenyl Formazone, TF),TF呈现红色,在波长485nm处有最大吸收峰,采用分光光度法于485nm测定其吸光值,即得土壤脱氢酶活性。

自备实验仪器及用品:

筛子、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、漏斗,滤纸、可见分光光度计、玻璃比色可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、冰、蒸馏水、丙酮(不允许快递,请用户自备)。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

抗生素5号 Antibiotic NO.5 250g

1瓶 D341 Med细胞株 D341 Med 低温运输和保存

TSA平板(7cm) Tryptose Soya Agar 38个/包

10U ATP硫酸化 ATP Sulfurylase -20℃保存

500mL PIPES Buffered Saline,5X,pH7.0  PIPES Buffered Saline,5X,pH7.0  常温保存

1g 氨苄干粉 Ampicillin Powder 4℃保存

2 ug pPink LC pPink LC 低温运输,-20℃保存

葡萄糖发酵管  20支

2 ug pMSCV-puro pMSCV-puro 低温运输,-20℃保存

mCPC mCPC Medium 250g

25g L- 盐酸盐 L-Histidine HCl    室温干燥保存

土壤脱氢酶(SDHA)测试盒可见分光光度法EMP3  上皮细胞膜蛋白3抗体 规格: 0.2mlELL2  聚合延伸因子2抗体 规格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Cy3  Cy3标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlPhospho-Bad(Ser118)  磷酸化相关死亡促进因子抗体 规格: 0.1ml

phospho-c-Jun(Tyr170)  磷酸化原基因c-Jun抗体 规格: 0.1mlbeta 2 Microglobulin  β2微球蛋白抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/Cy3  Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 规格: 0.1mlPhospho-HER4 (Tyr1162)  磷酸化HER4抗体 规格: 0.1ml

CK15  细胞角蛋白15抗体 规格: 0.1mlCYP24A1  细胞色素P450 24A1抗体 规格: 0.2ml

Mast Cell Tryptase  肥大细胞蛋白7抗体 规格: 0.1mlFactor VII light chain  凝因子VII 规格: 0.2ml

RABGAP1  Rab蛋白GTP激活蛋白1抗体 规格: 0.2mlCOX7A2  氧化VIIA亚型2抗体 0.1ml

Phospho-Insulin Receptor Beta(Tyr1185)  磷酸化胰岛素受体β抗体 规格: 0.1mlCollagen VII  7型胶原抗体 规格: 0.1ml

phospho-EPH A3+A4+A5 ( Tyr779)  磷酸化内皮细胞受体蛋白酪激A3+A4+A5抗体 规格: 0.1ml

SPARCL1/Ecm2  细胞外基质蛋白2抗体 规格: 0.2ml

Phospho-NMDAR1(Ser897)  磷酸化谷受体1抗体 规格: 0.1ml

FDC-SP/ADC  滤泡树突细胞分泌蛋白抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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