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实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,54个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
植物全钙浓度测试盒火焰光度法 | 咨询 | 火焰光度法 | BK-01S6817 |
商品介绍:
测定意义: 钙是植物结构组成元素,主要构成果胶酸钙、钙调素蛋白、肌醇六磷酸钙镁等,在液泡中有大量的有机酸钙,如草酸钙、柠檬酸钙、苹果酸钙等。钙能稳定细胞膜、细胞壁,还参与第二信使传递,调节渗透作用,具有酶促作用等。 测定原理 浓硫酸高温消解植物样品,采用火焰光度计测定样品中的钙含量。 |
试剂组成和配制:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约12个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
1次 96孔板病毒DNAout(离心法) 96 Microwell Plate Viral DNAOUT 常温
2 ug pET-26b(+) pET-26b(+) 低温运输,-20℃保存
TSA-YE平板(9cm) 9cm*10
1瓶 6T-CEM细胞株 6T-CEM 低温运输和保存
12个 0.5mLDNA超滤离心管(30-50KD)
24 T 乙酰酯测试盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存
25mL Orange-G Loading Dye (6X, Glycerol based) Orange-G Loading Dye (6X, Glycerol based) 常温保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 6(质体 rbcL) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMAL- p2x pMAL- p2x 低温运输,-20℃保存
液体 Liquid medium 250g
1瓶 RF/6A细胞株 RF/6A 低温运输和保存
植物全钙浓度测试盒火焰光度法Tyk2 非受体酪蛋白激2抗体 规格: 0.2mlTenascin C (C terminal) 细胞粘合素抗体(C端)腱糖蛋白-C(固生蛋白)抗体 规格: 0.1ml
ENAH/MENA ENAH蛋白抗体 规格: 0.2mlPERP/p53 apoptosis effector related to PMP22 p53凋亡相关作用蛋白PMP22抗体 规格: 0.1ml
INCA1 INCA1蛋白抗体 规格: 0.2mlADAMTS4 整合素样金属蛋白与凝4型抗体 0.1ml
CCDC125 卷曲螺旋结构域蛋白125抗体 规格: 0.2mlWnt8b WNT蛋白家族Wnt8b抗体 规格: 0.2ml
Acetyl-Histone H4(K16) 乙酰化组蛋白H4(K16)抗体 0.1mlPhospho-ATP1A1(Ser23) 磷酸化钠钾ATP蛋白a1抗体 规格: 0.1ml
CNOT8 细胞表面趋化因子受体4相关蛋白8抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgM 兔抗马IgM 规格: 1mg
PAK7/PAK5/MBT 激活激PAK7抗体 规格: 0.2mlPhospho-PLC gamma 2(Tyr753) 磷酸化磷酯Cγ2抗体 规格: 0.1ml
TIMM17A 线粒体内膜转位抗体 规格: 0.2mlCLDND2 膜蛋白CLDND2抗体 规格: 0.2ml
H1N1 Hemagglutinin 1/HA probe 甲型毒凝素抗体 规格: 0.2ml
Claudin 11/OSP(Oligodendrocyte Marker) 少突胶质细胞跨膜蛋白抗体 规格: 0.1ml
Lin28 RNA结合蛋白LIN28抗体 规格: 0.2ml
CK3 细胞角蛋白3抗体 规格: 0.1ml
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