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实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:总多糖含量测试盒可见分光光度法
产品规格:50管/48样
检测方法:可见分光光度法
产品货号:BK-01S6770
产品分类:糖代谢系列
商品介绍:
测定意义: 多糖是生物体中广泛存在的物质,是一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的天然高分子多聚物,它是生物体内重要的生物大分子,是维持生命活动正常运转的基本物质之一。 测定原理: 利用水提醇沉法提取总多糖,-硫酸法测定总多糖含量。 需自备的仪器和用品: 酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、无水乙醇、浓硫酸、蒸馏水、水浴锅。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
50次 一步式细菌DNAout One-Step Bacterial DNAOUT 常温保存(需要-20℃保存)
2 ug pET-17xb pET-17xb 低温运输,-20℃保存
FB1(Half-Fraser)添加剂(A、B) FB1 additive(A、B) 2ml*40
1瓶 293T细胞株 293T 低温运输和保存
100支 1000 μL RNase-free 蓝吸头(盒装已灭菌) 常温
100次 神经检测试剂盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存
100mL MES Buffer,0.5M,pH6.5 MES Buffer,0.5M,pH6.5 常温保存
100次 动物种属鉴定PCR Mix 6(ITS1-5.8S-ITS2区) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMA5 pMA5 低温运输,-20℃保存
半稀释液 Cysteine Diluent 250g
1瓶 RAG细胞株 RAG 低温运输和保存
总多糖含量测试盒可见分光光度法CCDC23 卷曲螺旋结构域蛋白23抗体 规格: 0.2ml
MYL9 肌球蛋白轻链9抗体 规格: 0.1ml
H1N1 matrix protein 2 甲型毒M2抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的羊抗小鼠IgM 规格: 0.1ml
Phospho-NMDAR2A/NR2A (Tyr1246) 磷酸化谷受体2A抗体 规格: 0.1ml
FGF5 纤维母细胞生因子5抗体 规格: 0.1ml
IGF2BP1/IMP1 胰岛素样生因子ⅡmRNA结合蛋白1抗体 规格: 0.2ml
Phospho-PIM1(Tyr218) 磷酸化前毒整合位点蛋白1抗体 规格: 0.1ml
Ki-67 (Proliferation Marker) Ki67蛋白抗体 规格: 0.1ml
SDCCAG8 结肠抗原8抗体 规格: 0.2ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠k链 规格: 0.1ml
CD15/Fut4/SSEA-1 阶段特异性胚胎表面抗原-1抗体 规格: 0.1ml
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