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注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:纤维素含量(CLL)测试盒可见分光光度法
产品规格:50管/48样
检测方法:可见分光光度法
产品货号:BK-01S6772
产品分类:糖代谢系列
商品介绍:
测定意义: 纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖,通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起,是植物细胞壁的主要结构成分。纤维素是一种重要的膳食纤维,是自然界中分布*、含量最多的一种多糖。 测定原理: 纤维素为β-葡萄糖残基组成的多糖,在酸性条件下加热能分解成β-葡萄糖。β-葡萄糖在强酸作用下,可脱水生成β-糠醛类化合物。β-糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合,生成糠醛衍生物。颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、80%乙醇、丙酮、浓硫酸(不允许快递)、研钵和蒸馏水。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.0 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.0 常温保存
0.25mL UTP溶液,100mM UTP Solution -20℃保存
2 ug pLVX-mCherry-C1 pLVX-mCherry-C1 低温运输,-20℃保存
PEA琼脂 HB7035 250g
1瓶 PC-3M-IE8细胞株 PC-3M-IE8 低温运输和保存
萘啶酮酸 Nalidixic Acid 1.5mg/支*5
10g 几丁质 Chitin 室温干燥保存
500mL Zymogram Renaturation Buffer,10X Zymogram Renaturation Buffer,10X 常温保存
5g DTT,蛋白级 DTT,Protein Grade -20℃保存
2 ug pBBR1-MCS4 pBBR1-MCS4 低温运输,-20℃保存
20次 一站式GST标记蛋白质微量纯化套装(溶破细胞) One-Stop GST-Tagged Protein Miniprep Pack 介质需4℃保存,、Benzonase和PMSF需-20℃保存
纤维素含量(CLL)测试盒可见分光光度法ACOT8 酰基辅A硫酯8 0.2ml
ZNF185 锌指蛋白185抗体 规格: 0.2ml
phospho-ATG4A(Ser100) 磷酸化自噬相关蛋白4A抗体 规格: 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlRabbit Anti-Bovine IgM/Cy3 Cy3标记的兔抗牛IgM 规格: 0.1ml
Profilin 1 前纤维蛋白1抗体 规格: 0.1mlGMRP1/BTBD10 糖代谢相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml
Angiotensin II 管紧张素Ⅱ抗体 规格: 0.2mlSCN8A/Nav1.6 钠通道蛋白8α抗体 规格: 0.1ml
Brs3/Bombesin Receptor 3 蛙皮素受体3抗体 规格: 0.1mlphospho-EGFR (Tyr869) 磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1ml
NTAL B淋巴细胞链接激活蛋白抗体 规格: 0.2mlDonkey Anti-human IgG/APC APC标记的驴抗人IgG 规格: 0.1ml
Phospho-Stat4 (Tyr693) 磷酸化信号转导和转录激活因子4抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-mouse IgM/Gold 胶体金标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.5ml
FAIM2 FAS凋亡抑制分子2 规格: 0.2mlUCP-2 线粒体脱偶连蛋白2抗体 规格: 0.1ml
Phospho-Histone H3 (Thr11) 磷酸化组蛋白H3抗体 规格: 0.1mlUBE1/E1 Ubiquitin Activating Enzyme 泛素激活E1抗体 规格: 0.2ml
DHPS1 短链脱还原1抗体 规格: 0.2mlLRRC62 富含亮重复蛋白62抗体 规格: 0.2ml
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