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实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,6929个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
糖原含量测试盒微量法 | 100管/96样 | 微量法 | BK-01S6729 |
商品介绍:
测定意义: 糖原是由葡萄糖单位构成的高分子多糖,是糖的主要的储存形式之一,主要贮存在肝和肌肉中作为备用能量,分别称为肝糖原和肌糖原。肝糖原可调节血糖浓度,当血糖升高时可在肝脏合成糖原,血糖降低时,肝糖原则分解为葡萄糖以补充血糖。因此,肝糖原对维持血糖的相对平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的储存形式,在剧烈运动消耗大量血糖时,肌糖原不能直接分解成血糖,必须先分解产生乳酸,随血液循环到肝脏,通过糖异生转变为肝糖原或葡萄糖。 测定原理: 蒽酮法。利用强碱性提取液提取糖原,在强酸性条件下利用蒽酮显色剂测定糖原含量。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、浓硫酸(不允许快递)和蒸馏水。 |
试剂组成和配制:
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约366个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
100mL 琼脂糖凝胶 2B Sepharose 2B 4-8℃保存
50T 小麦PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
200 mL 大鼠内皮细胞分离液1.066 Cell Separation Solution -20℃保存
100mL Glycylglycine Buffer,0.5M,pH7.5 Glycylglycine Buffer,0.5M,pH7.5 常温保存
25g 异硫酸胍 Guanidine Thiocyanate 室温干燥保存
2 ug pAdTrack pAdTrack 低温运输,-20℃保存
缓冲动力-硝酸盐培养基 Buffered Power - nitrate medium 250g
1瓶 MDCK细胞株 MDCK 低温运输和保存
LB肉汤 LB Broth 250g
5g 氨苄钠 Ampicillin, Sodium Salt 4℃保存
250mL TE Buffer,pH7.4 TE Buffer,pH7.4 常温保存
糖原含量测试盒微量法PAS1C1 核纤层蛋白A相关结构蛋白1抗体 规格: 0.2ml
DARC/CD234 Duffy型趋化因子受体抗体 规格: 0.2ml
phospho-IRS1(Ser302) 磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 规格: 0.1ml
Eppin 附睾蛋白抑制蛋白 规格: 0.2ml
DPY19L1 短粗矮胖19蛋白样1抗体 规格: 0.2ml
FPR3/Lipoxin A4 receptor 甲酰肽受体3抗体(脂氧素A4受体) 规格: 0.2ml
Cyclin C 周期素C抗体 规格: 0.1ml
CCDC107 卷曲螺旋结构域蛋白107抗体 规格: 0.2ml
Contactin 6/NB3/CNTN6 神经细胞NB3特定蛋白抗体 规格: 0.2ml
H1N1/H5N1/H3N2 nucleocapsid protein A型毒核衣壳蛋白抗体 规格: 0.2ml
Cdc25B 细胞分裂周期蛋白25B抗体 规格: 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio 标记的小鼠抗兔IgM 规格: 0.1ml
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