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注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:海藻糖6磷酸酯酶(TPP)测试盒可见分光光度法
产品规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
产品货号:BK-01S6724
产品分类:海藻糖系列
商品介绍:
测定意义: 海藻糖是功能性低聚糖,具有非还原性、保湿性、热酸稳定性、抗冻结性等特性,是细胞在不良环境条件下产生的一种重要的抗逆应激物之一,它对生物大分子和生物体组织有着非特异性的保护作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麦芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的关键途径之一。 测定原理: TS催化麦芽糖产生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麦芽糖为葡萄糖,通过葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,按照麦芽糖减少的量表示海藻糖合酶活性。 需自备的仪器和用品: 分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
5g 亮绿 Brilliant Green 室温保存
500mL Tris-Tricine-SDS Buffer,10X Tris-Tricine-SDS Buffer,10X 常温保存
25Inh.U α2巨球蛋白 α2-Macroglobulin -20℃保存
2 ug pTYB 1 pTYB 1 低温运输,-20℃保存
50次 柱式冻存血液DNAout Column Frozen Blood DNAOUT 常温
2 ug psiSTRIKE psiSTRIKE 低温运输,-20℃保存
BL琼脂培养基 BL Agar Medium 250g
1000U Thrombin From Bovine Plasma -20℃保存
50T 致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
10mg Hoechst 33258干粉 Hoechst 33258 Powder -20℃干燥避光保存
100mL Imidazole Buffer(咪唑缓冲液),0.5M,pH6.5 Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5 常温保存
海藻糖6磷酸酯酶(TPP)测试盒可见分光光度法Insulin 胰岛素抗体 规格: 0.1ml
CSNK1G2 酪蛋白激1γ2抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold 胶体金标记的兔抗牛IgM 规格: 2ml
Hsp93 热休克蛋白93抗体 规格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/PE-CY5 PE-CY5标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1ml
SCN1A SCN1A抗体 规格: 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/PE PE标记的羊抗小鼠IgG 规格: 0.1ml
NDUFA1 NADH氧化还原辅1抗体 规格: 0.2ml
AMACR/P504S α-甲基酰基辅A消旋抗体 规格: 0.1ml
AMPK beta 1 苷单磷酸活化蛋白激β1抗体 规格: 0.1ml
HBAB/AKR1C2 胆汁酸结合蛋白DDH2抗体 规格: 0.2ml
FGF14 成纤维细胞生因子14抗体 规格: 0.2ml
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