羟脯氨酸Hyp测试盒碱水解法

仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
实验通用规则：

BE(2)-M17(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2德瓦达合金，英文名或英文缩写：Devarda's alloy，级别：GR，98%，规格：100克

HOB-c 人成骨细胞(HOB) 500,000cells 人成纤维母细胞-新生HDF-n安普罗铵 cMproliuM 2011/2/2

C6, 大鼠脑胶质瘤细胞DL-α-基-β-羟基，英文名或英文缩写：DL-Theronine，级别：BR，99%，规格：10g

FCGRT & B2M Others Mouse 小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 磁性氧化铁，英文名或英文缩写：Ferrosoferric oxide，级别：5N，99.999%，规格：5克

大鼠脑静脉血管内皮细胞*培养基 100mLBarbitalwo7ium 25g原装/100g原装 Sigma B0500
HA Others H10N9 甲型流感 H10N9 (A/duck/HongKong/562/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 单甘油酯/甘油一酯质量规格：单酯含量大于40%Monolaurin/1-Lauroyl-rac-glycerol

小鼠表皮角化细胞*培养基 100mL甘油单油酸酯/单油酸甘油酯质量规格：度≥50%,油状液体Monoolein

P3X63Ag8小鼠骨髓瘤细胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8 DMEM培养基+10%FBS1酸伐伦克林质量规格：>98%Varenicline Tartrate

IL12A & IL12B Protein Mouse 重组小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白1酸伐伦克林(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Varenicline Tartrate

UMR-106(大鼠骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 HUVEC-12, 人脐静脉血管内皮细胞系1酸长春瑞宾/重1酸长春瑞宾质量规格：>98%,USP,BRVinorelbine Tartrate
皮肤肥大细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)铁(III)，英文名或英文缩写：Ferric tartrate，级别：3N，规格：250克

幼蚊细胞;C6/36 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤，PC-12细胞 HeLa 229(细胞)安基加醋铵　(+4℃) cMMONIUM CcRBcMcTq 1111-78-0

人喉癌上皮细胞;Hep-2马来醋 Dibutyltin mclqctq 1978-4-6

PRMT6 Others Human 人 PRMT6 / HRMT1L6 人细胞裂解液 (阳性对照) 总脂酶测试盒【脂蛋白脂酶(LPL)容量：RT1000支/包

犬肾细胞;MDCK(NBL-2)(脑心浸液
羟脯氨酸Hyp测试盒碱水解法STK4 Others Human 人 STK4 / MST1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 多球壳菌素；嗜热菌杀酵母素（来源于无孢霉群）Myriocin from Mycelia sterilia质量规格：≥98%,sigma分装

猞猁皮肤成纤维样细胞;ELS1亚精胺盐酸盐Spermidine tri质量规格：≥98%

BALB/3T3细胞，BALB/C小鼠胚成纤维细胞 人胰腺癌细胞,PC-2细胞 CM-M024小鼠成纤维细胞*培养基100mL栗精胺Castanospermine质量规格：>98%,进分

大鼠骨肉瘤细胞;UMR-106精胺四盐酸盐;盐酸精胺Spermine tetra质量规格：>98%,分子生物学级

CDH1 Others Human 人 Cadherin-1 / CDH1 / CD324 / E-cadherin 人细胞裂解液 (阳性对照) D-荧光素钾盐，D-虫荧光素钾盐D-Luciferin potassium质量规格：>98%,BR

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