红细胞稀释液计数液

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
CM-R036大鼠小肠血管内皮细胞*培养基100mL卡维地洛（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品Carvedilol

C6 Others Human 人 C6 / compleme compone 6 人细胞裂解液 (阳性对照) 西地尼布质量规格：含量> 99%Cediranib

小鼠胎儿表皮角质形成层细胞*培养基 100mL孟鲁司特钠质量规格：>98%,EP7.3,BRMontelukast

Hela-Luc (稳定株)人细胞 Hela-Luc (stable sain) in human cervical cancer cells DMEM+10% FBS+200ug/ml Zeocin孟鲁司特钠(标准品)质量规格：>98%,标准品Montelukast

IL17F Protein Human 重组人 IL-17F / IL17F 蛋白β-葡聚糖酶质量规格：Enzyme activity>330万β - Glucanase
EB病毒转化的人B细胞;KMYF硼试剂质量规格：AR1-Hydroxy-4-p-toluidinoanthraquinone

TNFRSF1A Others Human 人 TNFRSF1A / TNFRI / CD120a 人细胞裂解液 (阳性对照) 石蕊质量规格：ARLitmus

T-104BII型胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL石英砂质量规格：BRQuartz sand

CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-氨基-1,2,4-三唑质量规格：>96%,分子生物学级3-AT

星形细胞生长添加物AGS1酸钠十二水质量规格：>98%,AR phosphate, tribasic, dodecahydrate
CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 溴百里酚蓝钠盐质量规格：ARBromothymol blue  salt

CL-0125J82(人膀胱癌细胞)5×106cells/瓶×2特地唑胺游离碱质量规格：>98%,BRTedizolid free base

P3X63-Ag8.653细胞，鼠骨髓瘤细胞 人Butt`s瘤细胞,NAMALWA细胞 小鼠网织细胞肉瘤;M5076特地唑胺;特地唑胺1酸酯质量规格：>99%;BRTedizolid phosphate;TR-701FA

AsPC-1(人胰腺癌细胞) 5×106cells/瓶×23--2-苯并噻唑酮腙盐酸盐，水合质量规格：>98%,BRMBTH  hydrate

CX3CL1 Others Human 人 CX3CL1 / N 人细胞裂解液 (阳性对照) 变色酸2R质量规格：ARChromotrope 2R
红细胞稀释液计数液THP-1人单核白血病细胞 Human甲磺酸依普罗沙坦;依普沙坦Eprosartan mesylate质量规格：>98%,血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂

CNAP2 Others Mouse 小鼠 CNAP2 / CASPR2 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸苯甲脒Benzamidine HCl质量规格：>98%,BR

人前列腺成纤维细胞RNAHPrF miRNA5 μg氯化铬;三氯化铬Chromium(III) chloride质量规格：>98%

BLNK Others Human 人 BLNK 人细胞裂解液 (阳性对照) 肌酸一水Creatine, monohydrate质量规格：>98%,BR

PANC-1 人胰腺癌细胞右旋糖苷/葡聚糖10Dextran-10质量规格：M.W:10000
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。