PMSF100mM

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
HFTF细胞，人胚胎眼Tenon's囊成纤维细胞 迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌 小耳猪肺细胞;SEP-L2灰毡毛忍冬皂苷乙（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Macranthoidin B

CCL21 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 CCL21 / 6Ckine 蛋白茴芹内酯质量规格：HPLC≥98%，标准品Pimpinellin

P19(小鼠畸胎瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 野猪 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人细胞裂解液 (阳性对照) 积雪草苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Asiaticoside

小鼠胚胎成纤维细胞;MEF吉马酮（标准品）质量规格：HPLC≥99%，标准品Germacrone

KDM1A Others Human 人 KDM1 / LSD1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 黄体生成激素释放激素（4-10）质量规格：>95%,BRLHRH (4-10)
CD1E & B2M Others Cynomolgus 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯化钙二水质量规格：>99%,BRCalcium chloride, dihydrate

EB病毒转化的绒猴细胞;B95-8乙二醇质量规格：BREthylene glycol

大鼠肝癌细胞;RH-35 肝癌细胞，QGY-7701细胞 NIT-1细胞，小鼠瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠SV40巨T抗原)乙硫异烟胺,硫异烟胺（标准品）质量规格：HPLC>98%,标准品amide

CaEs-17, 人食管癌细胞株 Human依曲韦林质量规格：>98%Etravirine

EML2 Others Human 人 EML2 / TLT2 人细胞裂解液 (阳性对照) 法莫替丁质量规格：>98%Famotidine
Raji(人Butt's瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SerpinE1 / PAI-1 人细胞裂解液 (阳性对照) Benzenesulfonicacid本磺酸500毫克BR，97%

人非小细胞肺癌细胞;NCI-H23甘安醋苄酯队本磺醋盐 Bqnzyl glycinctq p-toluqnqsulfonctq 1738-76-7

CD22 Others Mouse 小鼠 Siglec-2 / CD22 人细胞裂解液 (阳性对照) DEAE-葡聚糖凝胶 A-50 DEAE Sephadex A-50 39455-31-7 100G 分离试剂

HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞吡哆醛盐酸盐，英文名或英文缩写：Pyridoxal xy7nochloride，级别：AR，规格：25克

M17细胞，神经母细胞瘤细胞 非雄激素依赖型前列腺癌细胞,Tsu-Prl细胞 人神经束膜细胞RNAHPC miRNA5 μg(录化)
PMSF100mMLMAN2L Others Human 人 LMAN2L 人细胞裂解液 (阳性对照) 芦丁/芸香叶苷Rutin质量规格：>97%,BR

人大隐静脉平滑肌细胞*培养基 100mL芦丁/芸香叶苷(标准品)Rutin质量规格：≥98%，标准品

Mo-MuLV/3T3细胞，小鼠Mo-MuLv感染的3T3细胞 T/G HA-VSMC(人主动脉血管平滑肌细胞) 人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H2087新橙皮苷二氢查尔酮Neosperidin dihydrochalcone质量规格：≥95%,BR

CSF2 Protein Mouse 重组小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 (Fc 标签)新橙皮苷二氢查尔酮(标准品)Neosperidin dihydrochalcone质量规格：HPLC≥98%，标准品

T84(人结肠腺癌肺转移细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞(NK靶细胞);YAC-1氧化苦参碱Oxymatrine质量规格：≥98%,BR
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。