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产品名称 | AFLP试剂盒 |
检测方法 | 详见说明 |
规格 | 50T |
货号 | BK-S64360 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
MET Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 舒林酸(标准品)质量规格:检查Sulindac
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2HSP990质量规格:>98%,Hsp90抑制剂NVP-HSP990
中国仓鼠肺细胞;R 1610 [R1610] 口腔表皮样癌细胞,KB细胞 CIK细胞,草鱼肾脏细胞盐酸妥拉唑林(标准品)质量规格:含量测定Tolazoline HCl
人胚胎眼巩膜成纤维细胞;HFSF盐酸硫利达嗪(标准品)质量规格:鉴别Thioridazine
HA Others H13N8 甲型流感 H13N8 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 庆大霉素(标准品)质量规格:效价测定Gentamicin
SFTPD Others Mouse 小鼠 SFTPD 人细胞裂解液 (阳性对照) 异鸟苷水合物Isoguanosine Hydrate质量规格:美国进口
狗肾恶性组织细胞增生症细胞;DH823,5-O-(1,1,3,3-四异丙基-1,3-二硅氧烷)腺苷3',5'-O-(1,1,3,3-Tetraisopropyl- 1,3-Disloxanediyl)Adenosine 质量规格:美国进口
FGFR2 Others Human 人 FGFR2 / CD332 (aa 400-0625446) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 21-乙酰氧基孕1醇酮21-Acetoxypregnenolone质量规格:BR,美国进口
CL-0113HO-8910(人卵巢癌细胞)5×106cells/瓶×2珊瑚菜内酯,珊瑚菜素(标准品)phelloptorin质量规格:HPLC≥98%,标准品
THP-1人单核白血病细胞 低分化结肠腺癌细胞,HCT-116细胞 SK-MES-1(肺鳞癌细胞)鞣花酸(标准品)Ellagic acid质量规格:HPLC≥98%,标准品
3T3TK细胞,小鼠成纤维细胞 TNFa转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3-VP16-TNFa细胞 人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μgTHIOUREA蛋白组学级500G62-56-6RT
SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1(±)新烟减 (-)-cNcBcSINq 13078-04-1
EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照) L-本炳安醇 L-Phqnylglycinol 318-92-4
人结直肠腺癌细胞;Caco-2L-天冬酸5克RT
USP46 Others Human 人 USP46 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-芴甲氧羰酰基-L-蛋酸NA
AFLP试剂盒TACSTD2 Others Human 人 OP2 / TACSTD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 漆黄素Fisetin质量规格:HPLC≥95%,BR
山羊皮肤成纤维样细胞;DG-S1漆黄素(标准品)Fisetin质量规格:HPLC≥98%,标准品
PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人细胞裂解液 (阳性对照) 奇任醇(标准品)Kirenol质量规格:HPLC≥98%,标准品
HuTu-80 人十二指肠腺癌细胞千层纸素A(标准品)Oroxylin A质量规格:HPLC≥98%,标准品
WERI-Rb-1人视网膜神经胶质瘤细胞 WERI-Rb-1 human retinal glial cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯(标准品)5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol质量规格:HPLC≥98%,标准品
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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