甲基柠檬酸合酶(MCS）测试盒可见分光光度法

特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。

产品名称：甲基柠檬酸合酶(MCS）测试盒可见分光光度法

产品规格：50管/48样

检测方法：可见分光光度法

产品货号：BK-01S6592

产品分类：三羧酸循环系列
商品介绍：

所需的仪器和用品：

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验

样本和试剂浪费！

1、样本制备

实验方法学：

一、肝素的配制：

市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集：

全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

0.4mL dUTP溶液，100 mM dUTP Solution，100 mM -20℃保存

2 ug pLentiGuide-Puro pLentiGuide-Puro 低温运输，-20℃保存

改良LETHEEN琼脂基础 LETHEEN AGAR BASE, MODIFIED 250g

1瓶 MOLM-13细胞株 MOLM-13 低温运输和保存

LesEndo琼脂 m-Endo Agar，LES 250g

1g 阿利新蓝 8GX Alcian Blue8GX 室温干燥保存

100mL Transformation Buffer-2  Transformation Buffer-2  常温保存

30µL HRP标记内参抗体（β-actin）  

2 ug pTAL-Luc pTAL-Luc 低温运输，-20℃保存

25mg RNOligo(dT)纤维素  常温

2 ug pEGFP-Tub pEGFP-Tub 低温运输，-20℃保存

甲基柠檬酸合酶(MCS）测试盒可见分光光度法KChIP2  钾通道相互作用蛋白2抗体 规格: 0.2ml

AGFG1  艾滋毒复制结合蛋白抗体 规格: 0.2ml

Phospho-FRAP1/mTOR(Ser2448)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗体 规格: 0.1ml

PDEF/SPDEF  上皮特异性ETs转录因子抗体 规格: 0.1ml

CCDC52  卷曲螺旋结构域蛋白52抗体 规格: 0.2ml

VCP  含缬酪肽蛋白抗体 规格: 0.1ml

FEN1  结构特异性核酸FEN1抗体 规格: 0.2ml

Brn-2  大脑蛋白2抗体 规格: 0.2ml

SIRT4/SIR 2 like protein 4  沉默调节相关蛋白4抗体 规格: 0.2ml

AAK1  AP2关联激1抗体 0.2ml

Caspase-1(actived P10)  天冬-胱特异性蛋白家族抗体 规格: 0.1ml

Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml 

注意事项：

1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。