脲酶 EC3.5.1.5

仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
实验通用规则：

PDE9A Others Human 人 PDE9A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 铁蛋白质量规格：BR，20%水溶液Ferritin

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)鹅去氧胆酸(标准品)质量规格：HPLC>97%,标准品Chenodeoxycholic acid

FRhK-4细胞，恒河猴胚肾细胞 人胚胎胰腺组织来源细胞,CCC-HPE-2细胞 CM-M064小鼠前列腺上皮细胞*培养基100mL鹅去氧胆酸质量规格：>98%Chenodeoxycholic acid

大鼠癌细胞;MADB106(牛)质量规格：BR，27U/mg,进分INSULIN

IL1RAP Others Human 人 IL1R3 人细胞裂解液 (阳性对照) 双羟萘酸（标准品）质量规格：含量测定Pamoic acid
PLAUR Others Mouse 小鼠 uPAR / PLAUR / CD87 人细胞裂解液 (阳性对照) 4'-戊基苯乙酮(>95.0%(GC))4'-Pentylacetophenone质量规格：>95.0%(GC)

家猫肺细胞;FCA-L24-(反-4-丙基环己基)苯腈(>98.0%(GC))4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile质量规格：>98.0%(GC)

Spike Others MERS-CoV 中东呼吸综合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein S2 (aa 726-1296) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-磺酰杯[4]芳烃水合物(>94.0%(T))4-Sulfocalix[4]arene Hydrate质量规格：>94.0%(T)

脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)4-磺酰杯[6]芳烃水和物(>95.0%(HPLC))4-Sulfocalix[6]arene Hydrate质量规格：>95.0%(HPLC)

HUVEC, 人脐静脉内皮细胞 人上皮性卵巢癌细胞，TOV-112D细胞 RH-35(肝癌细胞)4-磺酸杯[8]芳烃水合物(>98.0%(HPLC)(T))4-Sulfocalix[8]arene Hydrate质量规格：>98.0%(HPLC)(T)
CL-0086GNM(人口腔鳞癌颈结转移癌细胞)5×106cells/瓶×2WATER,STERILE,NUCLEASE-FREE无菌水(无核酸酶,DEPC处理过)生物技术级透明无色液体RTsigma

NRK-52E，大鼠肾细胞酚试剂 3-Mqthyl-2-bqnzothiczolinonq hydrczonq xy7nochloridq monohydrctq 38894-11-0

EB病毒转化的人B细胞;KM932 人脐动脉内皮细胞*培养基 100mLURIDINE-5'-TRIPHOSPHATE5'-三嶙酸尿苷三钠超级白色粉末FROZENsigma

人脉络丛内皮细胞RNAHCPEC miRNA5 μgHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封组织学级无色至微黄液体RTsigma

IL23 Others Marmoset 狨猴 IL23A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 9003-53-6聚本 500Polystyrene
脲酶 EC3.5.1.5HDBEC-c adult 人类皮肤血内皮细胞(HDBEC)来自成年捐献者 500,000cells 角膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)溴酚红钠Bromophenol red,  salt质量规格：>80%,Ind Grade

食管平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)硬脂酸丁酯(>98%，BR)Butyl stearate质量规格：>98%，BR

EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) C10E6，10%溶液C10E6质量规格：BR

tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-1F3C12E10，10%溶液C12E10质量规格：BR

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS5A 肺癌细胞，LLC Lewis细胞 PCK细胞，大黄鱼肾细胞C12E9, 10%溶液C12E9质量规格：BR

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