苹果酸脱氢酶EC1.1.1.37

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
PDHA1 Others Human 人 PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸柔红霉素(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Daunorubicin HCl

人少突胶质细胞HO盐酸柔红霉素(进口)质量规格：USP,进分sigmaD8809 Daunorubicin HCl

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3 人肾癌细胞，A-704细胞 AGS(胃腺癌细胞)达格列嗪;达格列净质量规格：>97%，BR，生化试剂级Dapagliflozin

人神经母细胞瘤细胞;SH-SY5Y甘草查而酮 A(标准品)质量规格：含量≥98.0%，标准品Licochalcone A

FGF18 Others Mouse 小鼠 FGF18 / FGF-18 人细胞裂解液 (阳性对照) 三氯卡班质量规格：>98.0%Triclocarban
脑静脉血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)雌激素酮 3-硫酸钾盐Estrone 3-sulfate potassium salt质量规格：美国进口

H-4-II-E细胞，大鼠肝细胞瘤 人卵巢癌细胞,Caov-3细胞 人髓核细胞裂解物HNPCL雌激素酮 3-甲酯Estrone 3-methyl ether质量规格：美国进口

非洲绿猴肾细胞;VERO E64-伞形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR)4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide质量规格：>98%,BR

IFNB1 Others Human 人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB 人细胞裂解液 (阳性对照) 对硝基苄醇(>98%,BR)4-Nitrobenzyl alcohol质量规格：>98%,BR

家猫肾细胞;CATK1无毒型核酸染色剂4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green质量规格：BR
人神经星形胶质细胞*培养基 100mLSBES；2-溴乙基磺酸钠质量规格：>98.5% 2-bromoethanesulphonate

JB6-C41细胞，小鼠皮肤细胞 SHG44(胶质瘤细胞) 犬肾细胞系/野生型;MDCK/wildBICINE；N,N-二甘氨酸质量规格：>99%BICINE

EFNA1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 标签)BES  salt; N,N-二(2-)-2-氨基乙磺酸钠质量规格：>99%BES  Salt

LS 180(人结肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 原代上皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1mlBES free acid; N,N-(2-)-2-氨基乙磺酸质量规格：>99%BES free acid

人支气管上皮细胞HBEpiCBz-2'-脱氧胞苷亚1酰胺单体质量规格：>98%Bz-dC Phosphoramidite
苹果酸脱氢酶EC1.1.1.37大鼠肾小管上皮细胞*培养基 100mL舒马曲坦-d6Sumatriptan-d6质量规格：美国进口

RH-35大鼠肝癌细胞 RH-35 rat hepatoma cells DMEM培养基+10%FBS舒马曲坦-d6琥珀酸盐Sumatriptan-d6 Succinate质量规格：美国进口

IGFBP7 Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签)双氯芬酸甲酯Diclofenac Methyl Ester质量规格：美国进口

HA(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×2 内皮细胞培养基ECM双氯芬酸酰胺Diclofenac Amide质量规格：美国进口

食管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)芴甲氧羰基-加巴喷丁Fmoc-Gabapentin质量规格：美国进口
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。