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磷脂酶A2(PLA2)测试盒可见分光光度法

简要描述:磷脂酶A2(PLA2)测试盒可见分光光度法公司正在出售的产品:琼脂培养基S 英文名称:Agar medium S(R2A) 产品规格:250g RV肉汤(EP) 英文名称:Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth 产品规格:250g 盐琼脂 英文名称:Mannitol Salt Agar 产品规格:250g 琼脂培养基K(XLD琼脂) 英文

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-27
  • 访  问  量:659

详细介绍

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:磷脂酶A2(PLA2)测试盒可见分光光度法

产品规格:50管/24样

检测方法:可见分光光度法

产品货号:BK-01S6660

产品分类:脂肪酸代谢系列
商品介绍:

测定意义:

磷脂酶A2EC3.1.1.4)是磷脂sn-2位脂酰基水解酶,广泛存在于动植物组织、细菌、细胞核分泌物中,参与脂肪消化,精子成熟、细胞信号传递、脂质过氧化修复、宿主反应等生理过程,在控制体内磷脂类物质平衡、调节机体新陈代谢、参与疾病的病理进程等方面发挥着及其重要的作用。

测定原理

磷脂酶A2作用于2-硫代十六酰乙基磷酸(HEPC)产生游离巯基,与DTNB反应生成黄色物质,在412nm处有特征吸收峰。

自备实验用品及仪器

天平、超速冷冻离心机、研钵、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

1000 U 限制性内切PstI Restriction Endonuclease -20℃保存

100mL Sodium Cacodylate Buffer(二甲胂酸钠缓冲液),0.1M,pH6.8   Sodium Cacodylate Buffer,0.1M,pH6.8   常温保存

1 管 BL21大肠杆菌 BL21 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pQE-Tirs pQE-Tirs 低温运输,-20℃保存

HBI单增李斯特氏菌生化鉴定条(GB)  5条/盒

2 ug pcDNA3 YFP pcDNA3 YFP 低温运输,-20℃保存

WORT肉汤 Wort Broth 250g

2mg 亮抑肽 Leupeptin  -20℃保存

盐增菌液(SF) Selenite Enrichment Medium 250g

5mL 上皮细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

10g ATP Solution(ATP溶液),100mM ATP Solution,100mM 常温保存

磷脂酶A2(PLA2)测试盒可见分光光度法Filaggrin  兜甲蛋白抗体 规格: 0.2mlPhospho-Tyk2(Tyr1054/1055)  磷酸化非受体酪蛋白激2抗体 规格: 0.1ml

FGF4  纤维母细胞生因子4抗体 规格: 0.1mlCD150/SLAMF1  信号淋巴细胞活化分子CD150抗体 规格: 0.2ml

ENPP7  碱性鞘磷脂7抗体 规格: 0.1mlLCE2B  晚期包膜蛋白2B抗体 规格: 0.2ml

SAA4/Serum amyloid A 4 protein  清淀粉样蛋白4抗体 规格: 0.2mlPMS2  瘤错配修复基因PMS2抗体 规格: 0.1ml

CPA1/Carboxypeptidase A  胰羧肽A1抗体 规格: 0.1mlRNF56/CBLB  环指蛋白56 规格: 0.2ml

C Peptide  C-肽抗体 规格: 0.1ml

EML3  微管相关蛋白样蛋白3抗体 规格: 0.2ml

Acetyl-p53(K382)  乙酰化P53(Lys382)抗体 规格: 0.1ml

phospho-CDKN2A/P16 (Ser152)  磷酸化抑基因p16抗体 规格: 0.1ml

ABCG8  三磷酸苷结合转运蛋白G超家族成员8抗体 0.2ml

STAT6  信号转导和转录激活因子6抗体 规格: 0.1ml

Goat Anti-Chicken IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的羊抗鸡IgG 规格: 0.1ml 

 


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