磷脂酶A2（PLA2）测试盒微量法

实验结果判断我有妙招：

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2～3SD，作为阳性结果的阈值。

3、以P／N值(阳性孔OD值／阴性孔OD值)大于或等于2．1为阳性，P／N值小于2．1，但大于1．5为可疑，P／N小于1．5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法：加入底物经酶解和终止反应后，肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照，与阴性对照的颜色接近者，判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求：

① 易挥发、低燃点的试剂要密封，放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气，水发生反应的物质要密封，并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂，应将其固体或晶体密封保存，不宜长期存放其水溶液，亚硫酸，氢硫酸溶液要密封存放，钾，钠，白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存，其相应的溶液较固体更易反应，所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封，放于阴凉通风处保存。

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,04个工作日出结果,提供原始数据!

商品介绍：

试剂组成和配制:

提取液：液体 100 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 5 mL×1 瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体 15 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂三：液体 3 mL×1 瓶，4℃保存。

试剂四：液体 3 mL×1 瓶，4℃保存。

操作步骤：

1. 样品的准备：

a. 细胞样品的准备：收集细胞，用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心，取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备：动物用生理盐水(0.9% NaCl ，含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例， 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心，取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒（P1511）测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约3064个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如，小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-70 ℃冻存，但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作：

a. WST-8酶工作液的配制： 参照下表，根据待检测样品(包括标准品) 数量，配制适量WST-8酶工作液，配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。

注意：由于酶溶液的用量较少且易沉降，必须注意在使用前先轻轻离心一下，然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制：将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀，按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释，即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存，可当天使用，但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备：需自备SOD标准品，用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度：20U/ml，10U/ml ，5U/ml，2.5U/ml，1.25U/ml，0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升，参考样品进行检测。说明：为避免稀释后SOD酶活性的下降， SOD标准品宜现稀释现使用；本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品，但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

2 ug pcDNA3.1（hyg）+ pcDNA3.1（hyg）+ 低温运输，-20℃保存

马铃薯琼脂培养基 Potato Agar Medium 250g

100g 麦芽提取物 Malt Extract 室温保存

50T 脑膜炎病毒多重PCR检测试剂盒  低温运输，-20℃保存

100 mg 5（6）-CFDA Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

100mL Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0   Bis-Tris Buffer,0.2M,pH7.0   常温保存

20次 Southern Marker DL2000（DIG）  

2 ug pGEX-6P-2 pGEX-6P-2 低温运输，-20℃保存

美国药典培养基（USP标准）  

1瓶 H4-II-E-C3细胞株 H4-II-E-C3 低温运输和保存

TSA表面接触皿55mm  2694个每包

磷脂酶A2（PLA2）测试盒微量法Acetyl-Histone H4(K12)  乙酰化组蛋白H4抗体 规格: 0.1mlRabbit Anti-horse IgM/APC  APC标记的兔抗马IgM 规格: 0.1ml

PHLDA1/TDAG51  T淋巴细胞凋亡相关蛋白TDAG51抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-rabbit IgG/Cy5  Cy5标记的小鼠抗兔IgG 规格: 0.1ml

Phospho-NMDAR2B (Tyr1070)  磷酸化谷受体2B抗体 规格: 0.1mlMouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的小鼠抗羊IgG 规格: 0.1ml

CRYZL1  醌氧化还原样蛋白1抗体 规格: 0.2mlPAR-2  蛋白激活受体-2抗体 规格: 0.1ml

p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain  细胞色素b245轻链抗体 规格: 0.1mlPhospho-HP1(Tyr43)  异染色质蛋白1磷酸化抗体（果蝇） 规格: 1ml

Clathrin heavy chain/Clathrin HC  网格蛋白重链抗体 0.2mlSNX27  SNX27蛋白抗体 规格: 0.2ml

HMGCR  三羟基三甲基辅A还原抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗小鼠IgM 规格: 0.1ml

BMPER  BMP内皮细胞调节蛋白抗体 规格: 0.2mlCCDC83  卷曲螺旋结构域蛋白83抗体 规格: 0.2ml

IgHV/IgH  免疫球蛋白重链可变区抗体 0.2mlphospho-IRS1(Ser312)  磷酸化胰岛素受体底物-1抗体 规格: 0.1ml

CYP27A1  27α羟化抗体 规格: 0.2mlMLF1 Interacting Protein/PBIP1/KLIP  卡波西氏肉瘤疱疹毒潜伏核抗原相互作用蛋白1抗体 规格: 0.1ml

AAT1/C3orf15  3号染色体开放阅读框15抗体 规格: 0.2mlNCX2/SLC8A2  钠钙交换蛋白2抗体 规格: 0.1ml

POLA2  DNA聚合α2抗体 规格: 0.2mlHAVCR1/TIM1  损伤分子1抗体（甲型毒细胞受体1） 规格: 0.1ml