NFκB-p65 Phospho-Thr254 Antibody

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
SLIK1 Others Human 人 SLIK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 鸢尾黄素（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Tectorigenin

CL-0087H4(人脑神经胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2原B2(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Procyanidin B2

IgG2 Others Human 人 IgG2-Fc (257 Ser/Ala) 人细胞裂解液 (阳性对照) 原人参二醇（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Protopanaxdiol

小鼠直肠平滑肌细胞*培养基 100mL原人参三醇(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Protopanaxatriol

SV40 MES 13小鼠肾小球系膜细胞 SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells DMEM培养基+5%FBS愈创甘油（标准品）质量规格：含量测定Guaifenesin
猫星形脑胶质细胞;PG-4(S+L-)苯并[a]蒽(>98.0%(GC))Benz[a]anthracene质量规格：>98.0%(GC)

CDCP1 Others Human 人 CDCP1 / CD318 人细胞裂解液 (阳性对照) 1H-环五[l]菲(>95.0%(GC))1H-Cyclopenta[l]phenanthrene质量规格：>95.0%(GC)

人前列腺平滑肌细胞*培养基 100mL9-氨基喜树碱9-Aminocamptothecin质量规格：美国进口

A-431细胞，人表皮癌细胞 流感嗜血杆菌 BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1(R)-7-乙基喜树碱(R)-7-Ethyl Camptothecin质量规格：美国进口

CCL18 Protein Human 重组人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白 (His 标签)7-乙基-喜树碱-d37-Ethyl-d3-camptothecin质量规格：美国进口
人前列腺平滑肌细胞cDNAHPSMC cDNA乳糖-明胶培养基10克RT

EED Others Human 人 EED / Embryonic Ectoderm Developme 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 放现菌速 D cCTINOMYCIND 20-6-0

杂交瘤(B类);C3110D2B2化乙酰胆碱 (培养... Acetylcholine chloride (cell culture t... 60-31-1 25G 核酸衍生物

BT549细胞，管癌细胞 人喉癌细胞,M4e细胞 大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)DEXTRAN葡聚糖(分子量10000)试剂级白色粉末RTsigma

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A4(叶酸
NFκB-p65 Phospho-Thr254 Antibody稳定表达EBNA1的人胚肾细胞;293E外消旋5-羟去异丙基托特罗定-d6rac 5-Hydroxymethyl Desisopropyl Tolterodine-d6质量规格：美国进口

CD38 Others Rat 大鼠 SCARB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 外消旋去异丙基托特罗定rac Didesisopropyl Tolterodine质量规格：美国进口

人肾管状上皮细胞*培养基 100mL外消旋5-羟托特罗定rac 5-Hydroxymethyl Tolterodine质量规格：美国进口

B16F1细胞，小鼠色素瘤细胞 MRC-5(胚肺细胞) Asp2人胚胎肾细胞转化细胞;FC33外消旋5-羧基去异丙基托特罗定rac 5-Carboxy Desisopropyl Tolterodine质量规格：美国进口

CCL6 Protein Mouse 重组小鼠 CCL6 / C-C motif ligand 6 蛋白 (His 标签)S-(-)-托特罗定S-(-)-Tolterodine质量规格：美国进口
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。