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羧酸酯酶(CarE)测试盒微量法

简要描述:羧酸酯酶(CarE)测试盒微量法公司正在出售的产品:B(2.25万单位) 英文名称: 产品规格:2.25万单位*5支 D-发酵管(枯草芽孢杆菌) 英文名称: 产品规格:20支 肝汤 英文名称:Liver Broth 产品规格:250g 改良卵黄琼脂基础 英文名称:Mannitol-Egg-Yolk-Polymycin Agar Base,Modified 产品规格:250g

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-27
  • 访  问  量:688

详细介绍

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:羧酸酯酶(CarE)测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6546

产品分类:酯酶系列
商品介绍:

测定意义:

哺乳动物CarE,也称脂族酯酶(aliesterase),广泛分布于组织和器官,属于丝水解酶家族。CarE催化含酯键、酰胺键和硫酯键的内源性与外源性物质水解,但不能催化水解乙酰及其类似物。CarE参与脂质运输和代谢,并且与多种药物、环境毒物以及致癌物的解毒和代谢有关,有机磷农药可结合并且抑制CarE活性。

测定原理:

CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固篮显色;在450 nm光吸收增加速率,计算CarE活性。

自备仪器和用品:

紫外分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、低温离心机、水浴锅、可调式移液枪和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

50g 聚乙烯聚吡咯烷酮 Polyvinylpolypyrrolidone(PVPP) 室温干燥保存

50T 溶血性链球菌荧光PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

10 μg Leptomycin B(出核转运抑制剂) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

500mL EBC- Lysis Buffer  EBC- Lysis Buffer  常温保存

1.5mL 酵母tRNA溶液A(粗提)(5mg/mL) Yeast tRNA Solution -20℃保存

2 ug PinPoint Xa-2 PinPoint Xa-2 低温运输,-20℃保存

醛类中和剂管(带棉签)  10ml*20

1瓶 L7712细胞株 L7712 低温运输和保存

改良醇麦康凯琼脂添加剂 Modified Sorbitol MacConkey Agar Additives 1ml*5支

10mL 过氧化氢 Catalase A型4℃保存;B型-20℃

500mL Standard Ringer’s Solution (un-buffered)  Standard Ringer’s Solution (un-buffered)  常温保存

羧酸酯酶(CarE)测试盒微量法CRHR1/CRFR1  促上皮质释放激素受体1抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格: 0.1ml

ADAMTS8  整合素样金属蛋白与凝8型抗体 0.2ml

Lactoferrin  铁蛋白抗体 规格: 0.1ml

HOMER2  HOMER2抗体 规格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的小鼠抗人IgG 规格: 0.1ml

phospho-P53(Thr81)  磷酸化瘤抑制基因P53抗体 规格: 0.1ml

PPHLN1  脉周蛋白1抗体(胃抗原蛋白Ga50) 规格: 0.2ml

DDIT4L  DNA损伤诱导转录样蛋白4抗体 规格: 0.2ml

FGFR1OP/FOP  成纤维细胞生因子受体1原基因伴侣蛋白抗体 规格: 0.2ml

CD45/B220  白细胞共同抗原抗体 规格: 0.1ml

Ribonuclease Inhibitor  核糖核酸抑制因子1抗体 规格: 0.2ml 

 


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