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产品名称 | Akt Phospho-Thr308 Antibody |
检测方法 | 兔多克隆抗体 |
规格 | 50μl |
货号 | BK-S64529 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 TNFRSF17 人细胞裂解液 (阳性对照) 亚胺培南-西司他丁钠质量规格:含量:Imipenem≥400μg/mg,Cilastatin(C16H26N2O5S) ≥400μg/mg,USP36Imipenem and Cilastatin
CL-0435SF126(人脑瘤细胞)5×106cells/瓶×2长春西丁,长春西汀质量规格:>99%,BP,BRVinpocetine
HA Others H12N1 甲型流感 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 苯妥英钠质量规格:>99%,BRPhenytoin
大鼠视网膜神经节细胞*培养基 100mL阿扎那韦(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Atazanavir
HL-7702人正常肝细胞 HL-7702 human normal liver cell 1640+10% FBS盐酸托莫西汀质量规格:>99%,BRAtomoxetine HCl
内脏脂肪细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)脱氢吲达帕胺Dehydro Indapamide质量规格:美国进口
TFPI2 Others Mouse 小鼠 TFPI2 / PP5 人细胞裂解液 (阳性对照) CHPS-Na;3-氯-2-羟基丙磺酸钠CHPS-Na质量规格:>98.5%
大鼠主动脉平滑肌细胞*培养基 100mLSBES;2-溴乙基磺酸钠 2-bromoethanesulphonate质量规格:>98.5%
293-L.P.人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line 293-L.P. MEM+10% FBSBICINE;N,N-二甘氨酸BICINE质量规格:>99%
IFNG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白BES salt; N,N-二(2-)-2-氨基乙磺酸钠BES Salt质量规格:>99%
人羊膜细胞;WISH4-十八烷氧基苯(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)4-Octadecyloxybenzaldehyde
LSAMP Others Human 人 LSAMP 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-丙氧基苯(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)4-Propoxybenzaldehyde
HCT 116 人结肠癌细胞4'-丁基苯乙酮(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)4'-Butylacetophenone
OS-RC-2人肾癌细胞 Human renal cell carcinoma OS-RC-2 cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4'-丁氧基苯乙酮(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)4'-Butoxyacetophenone
TNFSF13B Protein Human 重组人 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白4-酮基9-顺式-甲酯视黄酸质量规格:美国进口4-Keto 9-cis Retinoic Acid Methyl Ester
Akt Phospho-Thr308 Antibody小鼠T细胞瘤细胞;Cyc-Tag(S49)司帕沙星Sparfloxacin质量规格:>98.5%,BR,可用于细胞培养
CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人细胞裂解液 (阳性对照) 司帕沙星(标准品)Sparfloxacin质量规格:HPLC>98%,标准品
U251人胶质瘤细胞 Human glioma cell line U251 DMEM+10% FBS氟喹酮Afloqualone质量规格:>98%
U251细胞,人神经胶质瘤细胞 滑假丝酵母 人海马趾神经元RNAHN-h miRNA5 μg氟喹酮(标准品)Afloqualone质量规格:>98%,标准品
RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2磺胺醋酰钠 SA-NASufacetamide 质量规格:>99%,BR
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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