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仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
产品名称 | LIMK2 Phospho-Thr505 Antibody |
检测方法 | 兔多克隆抗体 |
规格 | 50μl |
货号 | BK-S64583 |
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
实验通用规则:
大鼠牙细胞*培养基 100mL子囊霉素质量规格:>97%,BRAscomycin,FK520
PIEC猪髋动脉内皮细胞 PIEC pig iliac artery endothelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS子囊霉素(标准品)质量规格:HPLC>99%,标准品Ascomycin,FK520
IL36G Protein Human 重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169, His 标签)阿扎那韦质量规格:≥99.0%Atazanavir
NCTC 1469(小鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 HCT 116(结肠癌细胞)阿卡波糖质量规格:>97%,细胞培养级Acarbose
CL-0408NEC(人食管癌细胞)5×106cells/瓶×2阿卡波糖(标准品)质量规格:HPLC>95%,标准品Acarbose
EGF Protein Mouse 重组小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白L-苯丙氨酸甲酯盐酸盐L-Phenylalanine methyl ester 质量规格:>99%,BR
MKN-28(人胃癌高转移细胞) 5×106cells/瓶×2 脑微血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)L-(-)-葡萄糖(标准品)L-(-)-Glucose质量规格:>98%,标准品
前列腺上皮细胞培养基PEpiCM7-酮基去氢表雄酮7-Keto-dehydroepiandrosterone质量规格:>98%
SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人细胞裂解液 (阳性对照) 硝酸铷Rubidium nitrate质量规格:>99%
GES-1 人胃粘膜细胞CHIR-99021 (CT99021.HCl)CHIR-99021 (CT99021) HCl质量规格:>99%,GSK-3α/β抑制剂
CL-0337FO(小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×24-对乙酰氨基酚硫酸盐-d3质量规格:美国进口4-Acetaminophen-d3 Sulfate
RN-h, 大鼠海马趾神经元3-(N-乙酰-L-半胱氨酸-S-基)对乙酰氨基酚钠盐质量规格:美国进口3-(N-Acetyl-L-cystein-S-yl) Acetaminophen Salt
人皮肤成纤维细胞;HSAS4 人胎盘绒毛膜细胞*培养基 100mL2-十八1酸单甘油酯质量规格:美国进口2-Oleoylglycerol
人牙周膜成纤维细胞RNAHPLR miRNA5 μg1-月桂酰-3-氯质量规格:美国进口1-Lauroyl-3-chloropropanediol
AK2 Others Human 人 AK2 / Adenylate kinase 2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 4-丁基苯(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)4-Butylbenzaldehyde
LIMK2 Phospho-Thr505 Antibody坏死因子腺嘌呤核苷(腺苷)(标准品)Adenosine质量规格:HPLC>98%,标准品
人主动脉内皮细胞 (HAEC)( 5×105 ) BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus盐酸阿地芬宁Adiphenine HCl质量规格:含量> 99%
小鼠瘤细胞;EL4盐酸阿地芬宁(标准品)Adiphenine HCl质量规格:HPLC>98%,标准品
TFRC Others Mouse 小鼠 TFRC / CD71 / ansferrin Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸阿拉瑞林/丙氨瑞林 Alarelin Acetate质量规格:>98%,BR
MCF-7 人癌细胞阿仑1酸钠Alendronate 质量规格:>99%,USP
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