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转氢酶1测试盒紫外分光光度法

简要描述:转氢酶1测试盒紫外分光光度法公司正在出售的产品:胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤(TGPY) 英文名称: 产品规格:250g 厌氧卵黄琼脂基础 英文名称: 产品规格:250g D-环丝溶液 英文名称: 产品规格:5ml*10 梭菌强化琼脂 英文名称:Reinforced Clostridium Agar 产品规格:250g

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-27
  • 访  问  量:620

详细介绍

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:转氢酶1测试盒紫外分光光度法

产品规格:50管/48样

检测方法:紫外分光光度法

产品货号:BK-01S6566

产品分类:氧化磷酸化系列
商品介绍:

测定意义:

TH位于线粒体的内膜上,又称为线粒体复合体六,催化NADH+NADP+NAD++NADPH相互转化,调节线粒体NAD(H)NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2,催化NADPHNAD+生成NADP+NADH

测定原理:

NADHNADPH均在340nm有特征吸收,因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+TH-2催化APAD+还原生成APADHAPADH375nm有特征光吸收,测定375nm光吸收的增加速率,来计算TH-2活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

2 ug pCDH-EF-Luc2-T2A-TdTomato pCDH-EF-Luc2-T2A-TdTomato 低温运输,-20℃保存

孟加拉红培养基 Rose Bengal Medium 250g

2.5ku L- 乳酸脱氢 ( 兔肌 ) L-Lactic Dehydrogenase From Rabbit Muscle Type II 4℃保存

50T 绿脓杆菌PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

5mL 脑膜细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

100mL AMPSO Buffer,0.2M,pH8.5  AMPSO Buffer,0.2M,pH8.5  常温保存

100次 溴化乙锭清除剂 EB Erasol 室温保存

2 ug pACYC177 pACYC177 低温运输,-20℃保存

抗生素检定培养基1号(低PH) Antibiotic Agar  250g

1瓶 Eca-109(GFP)细胞株 Eca-109(GFP) 低温运输和保存

900ml缓冲蛋白胨水(BPW)均质袋 Buffered Peptone Water 900ml/袋*2

转氢酶1测试盒紫外分光光度法RIN1  RAS抑制蛋白1抗体 规格: 0.2mlphospho-PRKCA(Thr637)  磷酸化蛋白激C抗体 规格: 0.1ml

phospho-eIF4G(ser1108)  磷酸化真核翻译起始因子4G抗体 规格: 0.1mlEURL/C21orf91  21号染色体开放阅读框91抗体 规格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Bio  标记的驴抗豚鼠IgG 规格: 0.1mlRFTN2  RFTN2蛋白抗体 规格: 0.2ml

Phospho-A Raf(Tyr301/302)  磷酸化A-Raf抗体 规格: 0.1mlphospho-EGFR (Thr693)  磷酸化表皮生因子受体抗体 规格: 0.1ml

Metallothionein  金属硫蛋白抗体 规格: 0.2mlKir6.2  ATP敏性钾通道亚基kir6.2抗体 规格: 0.1ml

ANKRD13A  锚蛋白重复结构域蛋白13A抗体 规格: 0.2mlphospho-HMGCR(Ser872)  磷酸化三羟基三甲基辅A还原抗体 规格: 0.1ml

BCNG1/HCN1  脑环核苷酸门控通道蛋白1抗体 规格: 0.1mlIFNA4/IFNA76/IFNA M1  干扰素α4抗体 规格: 0.2ml

ILVBL  乙酰酸合成蛋白抗体 规格: 0.2mlBCL7B  BCL7B蛋白抗体 规格: 0.2ml

FAM134C  FAM134C蛋白抗体 规格: 0.2mlphospho-ATG4C(Ser166)  磷酸化自噬相关蛋白4C抗体 规格: 0.1ml

Leptin receptor(long)  瘦素受体抗体() 规格: 0.1mlCTDSPL2  CTDSPL2蛋白抗体 规格: 0.2ml

C21orf2  21号染色体开放阅读框2抗体 规格: 0.2mlphospho-CREB-1(Ser142)  磷酸化CREB-1抗体 规格: 0.1ml

Protein C inhibitor/SerpinA5  蛋白C抑制因子抗体 规格: 0.1mlC11orf57  11号染色体开放阅读框57抗体 规格: 0.2ml 

 


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