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仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
产品名称 | VASP Phospho-Ser239 Antibody |
检测方法 | 兔多克隆抗体 |
规格 | 50μl |
货号 | BK-S64609 |
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
实验通用规则:
家兔骨髓间充质干细胞;2012083MSC 人主动脉血管平滑肌细胞,T/G HA-VSMC细胞 MPC-11细胞,小鼠浆细胞瘤波生坦(水合物)质量规格:≥98.5%(HPLC),BR,一水合物Bosentan hydrate
人胚肺成纤维细胞;MRC-5波生坦水合(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Bosentan hydrate
HA Others H4N6 甲型流感 H4N6 (A/Swine/Oario/01911-1/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 福沙吡坦二甲葡胺(MK-0517) 质量规格:>99.0%;P/神经激肽受体拮抗剂Fosaprepitant dimeglumine
CL-0404NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2β-硫丹(标准品)质量规格:分析标准品β-Endosulfan
TGM2 Others Human 人 TGM2 / ansglutaminase 2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 硫丹醇(标准品)质量规格:分析标准品Endosulfan alcohol
MA, 小鼠星形胶质细胞L-谷氨酸二乙酯盐酸盐L-Glutamic acid diethyl ester 质量规格:0.97
RDFs, 大鼠成纤维细胞 ICPB 7[C-1;ICMP 8639;NCPPB 2626]细胞 CGM1(EB病毒转化的B细胞)L-丝氨酸(标准品)L-Serine质量规格:>99%,标准品
人口腔表皮样癌细胞;KBL-精氨酸(标准品)L-Arginine质量规格:HPLC≥98%,标准品
SERPINF1 Others Human 人 SerpinF1 / SERPINF1 / PEDF 人细胞裂解液 (阳性对照) L-精氨酸L-Arginine质量规格:≥98%,BR
人APP基因转染CHO细胞株;7WD10L-精氨酸盐酸盐L-Arginine 质量规格:>99%,BR
MADB106(大鼠癌细胞) 5×106cells/瓶×24,5-乙撑二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one
Promocell C-22110 Endothelial Cell GrowthMedium KIT, 内皮细胞生长培养基套装 500ml4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC))质量规格:>95.0%(HPLC)4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one
人牙龈成纤维细胞HGF3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)3,3'-Bithiophene
CL Others Human 人 CL-1 / CL / Chymoypsin-like protease 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))质量规格:>99.0%(GC)2,1,3-Benzothiadiazole
盘羊皮肤细胞;ASHS34,5-去亚异丙基托吡酯质量规格:美国进口4,5-Desisopropylidene Topiramate
VASP Phospho-Ser239 AntibodySK-N-SH, 人神经母细胞瘤细胞硝酸钯Palladium (II) nitrate dihydrate质量规格:BR
人恶性色素瘤细胞;A-375 [A375] 大鼠膀胱平滑肌细胞*培养基 100mL钯粉(>99%,BR)Palladium, powder质量规格:>99%,BR
M1 小鼠白血病细胞乙酸副品红(>85%,BS)Pararosaniline acetate质量规格:>85%,BS
KIT Others Human 人 c-KIT / CD117 人细胞裂解液 (阳性对照) 钙激活钾通道阻断剂来源于覃青霉Paxilline*, from Penicillium paxilli质量规格:>98%,BC
小鼠前胃癌细胞;MFC青霉酸(>98% (HPLC),BC)Penicillic acid质量规格:>98% (HPLC),BC
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