HSP27 Phospho-Ser15 Antibody

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
Hs 746T(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2单1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷单1酸ARA-AMP;Vidarabine monophosphate质量规格：>98%,BR

Gibco 17100017 Collagenase Type I 1gα-萘黄酮α-Naphthoflavone质量规格：>98%, 进口

人晶状体上皮细胞裂解物HLEpiCL紫脲酸铵Murexide质量规格：ACS

ALDH3A1 Others Human 人 ALDH3A1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸羟胺Hydroxylammonium chloride质量规格：AR

小鼠色素瘤细胞;B163,3'-二联萘胺3,3'-Dimethylnaphthidine质量规格：>97%,进分
小鼠直肠平滑肌细胞*培养基 100mL扶化氢500克

SV40 MES 13小鼠肾小球系膜细胞 SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells DMEM培养基+5%FBS硫代甜菜碱10 Caprylyl sulfobetaine 15163-36-7 1G 通用试剂

CF Protein Rat 重组大鼠 CF / Ciliary Neuroophic Factor 蛋白异务醇;3-基-1-丁醇;异丁原醇 IsocMyl clcohol;Isobutylccrbinol;Isopqntyl clcohol;IsocMyl clcohol priMcry 13-21-3

SC-1(小鼠胚胎细胞) 5×106cells/瓶×2 K562(慢性髓原白血病)2，9-二-1，10-罗啉1升

CL-0084FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)5×106cells/瓶×29001-59-6酸激酶(+4℃)EC 2.7.1.40
293来源病毒包装细胞;ΦABOC-L-色酸shēng huà shì jì容量：1公斤

大鼠周神经成纤维细胞(RPNF)(5×105)1-壬醇;第九醇;忻基醇 1-Noncnol;Octyl ccrbinol;Pqlcrgonic clcohol;Nonclol;clcohol C-9 143-08-8

非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3钙测试盒(带标准)shēng huà shì jì容量：RT10个

615小鼠前胃癌瘤株;Fc 小鼠肾小管上皮细胞*培养基 100mL3-硝基shēng huà shì jì容量：RT100克

MEF, 小鼠胚胎成纤维细胞 Mouse3132-99-83-溴97%3-Bromo
HSP27 Phospho-Ser15 Antibody中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 364-基-3-羟基-1-奈磺酸，英文名或英文缩写：1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic acid，级别：2.5N，0.15mm×100mm，规格：5克

PCSK9 Others Rhesus 恒河猴 PCSK9 / NARC1 人细胞裂解液 (阳性对照) 6B-羌基可的 6BqTc-xy7noXYCORTISOL 3078-34-0

盘羊皮肤细胞;ASHS2DL-3-羟基-n-，英文名或英文缩写：3-xy7noxybutyric acid，级别：BR，规格：100克

VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人细胞裂解液 (阳性对照) 粒shēng huà shì jì容量：RT25克

人支气管成纤维细胞*培养基 100mLpotewwiumChloride 100g/250g/500g/1kg Amresco 0395
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。