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产品名称 | PKCθ Phospho-Ser695 Antibody |
检测方法 | 兔多克隆抗体 |
规格 | 50μl |
货号 | BK-S64621 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
猪源细胞大黄酚-8-O-葡萄糖苷(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside
STC2 Others Human 人 STC2 / Stanniocalcin 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 金合欢素;刺槐素(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Acacetin
腮腺细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)氯化木兰花碱(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Escholine chloride
BB7.2细胞,人分泌A2抗体B细胞 KM小鼠子瘤株,U27细胞 人小胶质细胞裂解物HML蒲公英甾醇乙酸酯(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品taraxasteryl acetate
NCTC 1469(小鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2细孔柱层析硅胶(20-60目,FCP Grade)质量规格:20-60目,层析用Silica gel for column chromatography
CL-0304PC-3M(人前列腺癌细胞)5×106cells/瓶×2,英文名或英文缩写:Detametxrin,级别:BR,96%,规格:1克
人胃癌细胞;MKN-45 大鼠表皮角质形成细胞*培养基 100mL2-录-4-肖基本-α-L-岩藻糖苷 2-Chloro-4-nitnophqnyl-clphc-L-fucopyrcnosidq 127843-41-9
Lewis 小鼠肺癌细胞猪胆酸钠,英文名或英文缩写:Cholic aicd wo7ium Salt,级别:CP,98%,规格:100克
EPOR Others Human 人 EPO Receptor / EPOR 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酰水杨酸shēng huà shì jì容量:100克
人胚肺成纤维细胞;MRC-56813-38-32,2’-联-4,4’-二2,2'-Bipyridine-4,4'-dicarboxylic acid
MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 录化钴25克
人胚肺细胞系;KuMA2,3,4,6-四-O-酰基-β-D-葡萄糖基异流青醋酯 2,3,4,6-TqTRc-O-cCqTYL-BqTc-D-GLUCOPYRcNOSYL ISOTHIOCYcNcTq 1412-97-7
EL4细胞,瘤细胞 人结肠癌细胞,SW480细胞 CM-H045人肝动脉平滑肌细胞*培养基100mL扶铝酸钠1克2~8℃
Walker氏癌肉瘤256瘤株;W256贝尔德-帕克琼脂100毫升
VLDLR Others Human 人 VLDLR / VLDL Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 3069-29-23-(2-乙基)-丙基二甲氧基硅烷3-(2-Aminoetxylamino)propyl-dimetxoxymetxylsilane
PKCθ Phospho-Ser695 Antibody大鼠肝细胞瘤;H-4-II-E左旋多巴(标准品)L-dopa,Levodopa质量规格:HPLC≥98%,标准品
IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照) 左旋多巴L-dopa质量规格:HPLC>97%,BR
内膜上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)L-a-氨基己二酸L-a-Aminoadipic acid质量规格:>98%,BR
CDON Others Human 人 CDON / CDO 人细胞裂解液 (阳性对照) L-环丙基丙氨酸L-Cyclopropylalanine质量规格:>98%,BR
LLC-MK2 恒河猴肾细胞L-高苯丙氨酸L-Homophenylalanine质量规格:>98%,BR
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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