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产品名称 | AKT1 phospho-Thr450 Antibody |
检测方法 | 兔多克隆抗体 |
规格 | 50μl |
货号 | BK-S64744 |
仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
苯甲酰氧化芍药苷 HPLC≥98% 20mg 3%蛋白电泳聚集预制胶溶液500毫升
比枯枯灵 HPLC≥98% 20mg 3,4-二氢嘧啶同衍生物Monasol(K-ATPase抑制剂)
荜茇酰胺 HPLC≥98% 5mg 3’端衔接体(LINKER)连接试剂盒20
蓖麻酸 HPLC≥95% 0.1ml 3’末端DNA探针同位素([α32P]dATP)聚合酶标记试剂盒20
蝙蝠葛碱 HPLC≥98% 20mg 3’末端DNA探针同位素([α32P]dATP)转移酶标记试剂盒20
蝙蝠葛诺林碱 HPLC≥98% 20mg 3’末端DNA探针同位素([α32P]dCTP)聚合酶标记试剂盒20
蝙蝠葛苏林碱 HPLC≥98% 20mg 3’末端RNA探针同位素([32P]pCp)连接酶标记试剂盒20
蝙蝠葛新诺林碱 HPLC≥98% 10mg 3’末端RNA探针同位素([α32P]dATP)聚合酶标记试剂盒20
扁柏双黄酮 HPLC≥98% 20mg 3’末端RNA探针同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒20
扁塑藤素 HPLC≥98% 20mg 3’末端RNA同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒10
3%蛋白电泳聚集预制胶溶液500毫升 苯甲酰氧化芍药苷 HPLC≥98% 20mg
3,4-二氢嘧啶同衍生物Monasol(K-ATPase抑制剂) 比枯枯灵 HPLC≥98% 20mg
3’端衔接体(LINKER)连接试剂盒20 荜茇酰胺 HPLC≥98% 5mg
3’末端DNA探针同位素([α32P]dATP)聚合酶标记试剂盒20 蓖麻酸 HPLC≥95% 0.1ml
3’末端DNA探针同位素([α32P]dATP)转移酶标记试剂盒20 蝙蝠葛碱 HPLC≥98% 20mg
3’末端DNA探针同位素([α32P]dCTP)聚合酶标记试剂盒20 蝙蝠葛诺林碱 HPLC≥98% 20mg
3’末端RNA探针同位素([32P]pCp)连接酶标记试剂盒20 蝙蝠葛苏林碱 HPLC≥98% 20mg
3’末端RNA探针同位素([α32P]dATP)聚合酶标记试剂盒20 蝙蝠葛新诺林碱 HPLC≥98% 10mg
3’末端RNA探针同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒20 扁柏双黄酮 HPLC≥98% 20mg
3’末端RNA同位素([γ32P]ATP)激酶标记试剂盒10 扁塑藤素 HPLC≥98% 20mg
小鼠核糖核酸酶A3(RNASE3)ELISA试剂盒 ,英文名: RNASE3 ELISA Kit 莪术醇(标准品) Curcumol 质量规格:HPLC≥98%,标准品
人甲酰甲硫氨酸(fMet)ELISA检测试剂盒Humanformylmine,fMeISAKit 96T/48T 莪术二酮(标准品) Curdione 质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠脱氧胶原交联(DPD)试剂盒 Rat deoxypyridinoline,DPD ELISA Kit 蒽醌(标准品) Anthraquinone 质量规格:HPLC≥98%,标准品
英文名称RatHAELISAKIT大鼠透明质酸(HA)规格:96T/48T 蒽醌 Anthraquinone 质量规格:AR,>98%
呼吸链依赖性化线粒体氧化应激活性氧(ROS)初级荧光测定试剂盒20 1,3-二咖啡酰奎宁酸(标准品) Cynarin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
ELISAKitANG-4人血管生成素4规格:48T/96T 洋蓟素;1,5-二咖啡酰奎宁酸(标准品) 1,5-Dicaffeoylquinic acid 质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠核受体亚家族3C组成员1(3C1)ELISA试剂盒 ,英文名: 3C1 ELISA Kit 二氢丹参酮I(标准品) Dihydrotanshinone I 质量规格:HPLC≥98%,标准品
人丝氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA检测试剂盒Humanserineprotease,PRSSELISAKit 96T/48T 二氢欧山芹醇当归酸酯(标准品) Columbianadin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
大鼠脱氢表雄酮酯(DHEA-S)试剂盒 Rat Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEA-S ELISA Kit 二氢杨梅素 Dihydromyricetin 质量规格:HPLC≥98%,BR
英文名称RatHCYELISAKit大鼠同型半胱氨(HCY)规格:96T/48T 二氢杨梅素(标准品) Dihydromyricetin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
AKT1 phospho-Thr450 Antibody人羊膜间充质基质细胞雌激素酮-2,4,16,16-d4 3-钠盐质量规格:美国进口Estrone-2,4,16,16-d4 3-sulfate salt
5E Others Rat 大鼠 CD73 / 5E 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-羟基雌激素酮质量规格:美国进口2-Hydroxy Estrone
人胚肺二倍体细胞;KMB-17雌激素酮 3-钾盐质量规格:美国进口Estrone 3-sulfate potassium salt
A498细胞,人肾癌细胞系 蝙蝠肺细胞,Tb 1 Lu细胞 CL-0430RS1(大鼠皮肤成纤维样细胞)5×106cells/瓶×2雌激素酮 3-甲酯质量规格:美国进口Estrone 3-methyl ether
EA.hy926(人脐静脉细胞融合细胞) 5×106cells/瓶×24'-己基苯乙酮(>96.0%(GC))质量规格:>96.0%(GC)4'-Hexylacetophenone
实验通用规则:
1、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性,终止液对皮肤有腐蚀性,应尽量避免接触。
4、检测前,要打开酶标仪,使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
7、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
8、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加*。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的,要在临用前现配。
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