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查尔酮异构酶(CHI)测试盒微量法

简要描述:查尔酮异构酶(CHI)测试盒微量法公司正在出售的产品:柯氏尿素琼脂 英文名称: 产品规格:250g MLCB寒天培地 英文名称:MLCB Agar 产品规格:250g GN增菌液(10ml) 英文名称: 产品规格:10ml*20 H-顶层培养基 英文名称: 产品规格:250g

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-28
  • 访  问  量:477

详细介绍

特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。

产品名称:查尔酮异构酶(CHI)测试盒微量法

产品规格:100管/96样

检测方法:微量法

产品货号:BK-01S6468

产品分类:氧化与抗氧化系列
商品介绍:

测定意义:

查尔酮异构酶(Chalcone isomerase, CHI)是个被认识的黄酮类化合物合成相关酶,也是黄酮代谢途径中的关键酶之一。查尔酮异构酶和查尔酮合酶一起构成了黄酮类化合物生物合成的限速酶。

测定原理:

查尔酮异构酶(CHI)催化查尔酮环化形成 4,5,7-三羟基黄烷酮,通过测定381nm下的吸光度变化表示CHI的活性。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10 的比例进行提取

 

细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~10001 的比例进行提取。 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

QQ截图20220307153537.png 

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

1瓶 P19细胞株 P19 低温运输和保存

葡萄糖琼脂斜面管  20支/盒

100g 氯化钙,二水 Calcium Chloride, Dihydrate 室温干燥保存

250mL Triton Permeating Solution in TBS,10X  Triton Permeating Solution in TBS,10X  常温保存

1mL 胰凝抑制剂溶液,20mg/mL Chymostatin Solution -20℃保存

2 ug pYES2-EGFP pYES2-EGFP 低温运输,-20℃保存

100次 一管式拭子DNAout One-Tube Swab DNAOUT 常温

2 ug pEGFP- C1 pEGFP- C1 低温运输,-20℃保存

双歧杆菌BS培养基 Bifidobacterium BS Medium 250g

50mg 反玉米素 Trans-Zeatin -20℃保存

50T 猪弓形虫PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

查尔酮异构酶(CHI)测试盒微量法AER61  未知糖基化转移AER61抗体 规格: 0.2ml

Phospho-Progesterone Receptor(Ser190)  磷酸化孕激素受体抗体 规格: 0.1ml

LIX1  LIX1抗体 规格: 0.2ml

KIF2B  有丝分裂驱动蛋白样2B抗体 规格: 0.2ml

Acetyl-Histone H3(K18)  乙酰化组蛋白H3抗体 规格: 0.2ml

CAMKK2  钙调蛋白激激β抗体 规格: 0.1ml

FBXO4  FBXO4蛋白抗体 规格: 0.2ml

Phospho-PKR (Thr451)  磷酸化蛋白激R抗体 规格: 0.1ml

LIF  白抑制因子抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/Cy7  Cy7标记的兔抗大鼠IgG 规格: 0.1ml

TCRG  T细胞受体γ抗体 规格: 0.2ml

α-Adaptin  衔接蛋白α抗体 规格: 0.1ml 

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

 


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