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商品介绍:
测定意义: 生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能,对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。 测定原理: 巯基基团与5,5’- 二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在412nm处有最大吸收峰。 自备实验用品: 天平、研钵、可见分光光度计、恒温水浴锅、1mL玻璃比色皿和蒸馏水,甲醇。 |
提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,504个工作日出结果,提供原始数据!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
非蛋白质巯基测试盒可见分光光度法 | 50管/24样 | 可见分光光度法 | BK-01S6463 |
实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
操作步骤:
1. 样品的准备:
a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。
b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。
d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约592个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。
e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
2. 试剂盒的准备工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。
b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。
c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。
1瓶 786-O细胞株 786-O 低温运输和保存
592个 0.5mLDNA超滤离心管(90-150KD)
2 ug pCMV5-HA pCMV5-HA 低温运输,-20℃保存
250mL MOPS Buffer,1.0M,pH7.4 MOPS Buffer,1.0M,pH7.4 常温保存
100次 植物种属鉴定PCR Mix 7(质体 rpoB) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
2 ug pMAL-p4x pMAL-p4x 低温运输,-20℃保存
葡萄糖酸盐 20支
1瓶 RH-35细胞株 RH-35 低温运输和保存
Todd-Hewitt琼脂 Todd-Hewitt Agar 250g
50mg β-D- 阿糖胞苷 Cytosine β-D-Arabinofuranoside 4℃保存
50T 肠道病毒EV71/柯萨奇病毒A16型2联PCR检测试剂盒 低温运输,-20℃保存
非蛋白质巯基测试盒可见分光光度法Drebrin 脑发育调节蛋白抗体 规格: 0.2ml
CEA/CD66e/CEACAM5 胚抗原抗体 规格: 0.1ml
DP-II 桥粒斑蛋白2抗体 规格: 0.2ml
C CBL 原基因CBL2抗体 规格: 0.2ml
Rabbit Anti-Biotin/AP 碱性磷酸(AP)标记的兔抗抗体IgG 规格: 0.1ml
BMP8 骨形态发生蛋白8抗体 规格: 0.1ml
Annexin I 膜粘连蛋白 I抗体 规格: 0.1ml
Nephrin 小球细胞粘附分子受体抗体 规格: 0.1ml
ABI2 瘤抑制基因ABI2/酪蛋白激结合蛋白抗体 规格: 0.2ml
TFF1/BCEI 雌激素诱导蛋白抗体 规格: 0.1ml
phospho-Arhgef2(Ser810) 磷酸化Rho鸟苷酸交换因子2抗体 规格: 0.1ml
FSH/FSHB 促卵泡刺激素抗体 规格: 0.1ml
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