二氢黄酮醇还原酶（DFR）测试盒微量法

实验方法学：

一、肝素的配制：

市售肝素冻干粉140单位/mg，1克瓶装，每瓶140，000单位，称取0.1克肝素冻干粉，加生理盐水5ml，配成2800单位/ml。取50～100μl湿润管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不会凝固。老鼠血易凝固，所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉，加3ml生理盐水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制备：取0.1克肝素冻干粉，加2.5ml生理盐水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，湿润管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），横向转动，每隔5～10分钟转动一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液样本的收集：

全血根据收集的条件，分成不抗凝和抗凝两种。同时，不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清；抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1～2小时，直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血，轻轻颠倒充分抗凝后，可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征，选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

特别提醒：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。

产品名称：二氢黄酮醇还原酶（DFR）测试盒微量法

产品规格：100管/48样

检测方法：微量法

产品货号：BK-01S6464

产品分类：氧化与抗氧化系列
商品介绍：

所需的仪器和用品：

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的测定：

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验

样本和试剂浪费！

1、样本制备

注意事项：

1、试剂二为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于2，建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用（10μl试剂二原液+60μl蒸馏水）。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？

对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是（1）试剂二或试剂四没有现配现用；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

1瓶 HT-29（RFP）细胞株 HT-29（RFP） 低温运输和保存

2 ug pYCPlac22-EGFP pYCPlac22-EGFP 低温运输，-20℃保存

10次 百万碱基级细菌(G-)DNAout  

2 ug pAAV-LacZ pAAV-LacZ 低温运输，-20℃保存

含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆琼脂（TSA-YE） Trypticase Soy-Yeast Extract Agar 250g

1瓶 293ET细胞株 293ET 低温运输和保存

96支 200μLRNase-free黄吸头(盒装已灭菌带芯)  常温

24 T 醛缩测试盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

250mL MES Buffer,0.2M,pH6.5   MES Buffer,0.2M,pH6.5   常温保存

100mg P- 苯基 p-Nitrophenylphosphorylcholine（NPCC） -20℃保存

2 ug pLVX-Tet-3G pLVX-Tet-3G 低温运输，-20℃保存

二氢黄酮醇还原酶（DFR）测试盒微量法DAL1/EPB41L3  细胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗体 规格: 0.2ml

Phospho-p57 Kip2 (Thr310)  磷酸化周期蛋白依赖激抑制因子1C抗体 规格: 0.1ml

OLFM4  凋亡蛋白OLFM44抗体 规格: 0.2ml

SMC4  染色体结构维持蛋白4抗体 规格: 0.2ml

CCL25/TECK  胸表达趋化因子抗体 规格: 0.2ml

C1GALT1  N-乙酰半糖胺糖蛋白3、β-半糖转移1抗体 规格: 0.2ml

RAMP1  受体活性修饰蛋白1抗体 规格: 0.2ml

CKLFH6/CMTM6  趋化素样因子超家族成员6抗体 规格: 0.2ml

KLHL3  Kelch样蛋白3抗体 规格: 0.2ml

phospho-GNA12(Ser68)  磷酸化鸟苷酸调节蛋白12抗体 规格: 0.1mlTOP2 alpha  DNA拓普西异构ⅡA抗体 规格: 0.1ml

TRIM17/RNF16  环指蛋白16抗体 规格: 0.2mlGoat Anti-Chicken IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的羊抗鸡IgG 规格: 0.1ml

Contactin 3  脑源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗体 规格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的驴抗人IgG 规格: 0.1ml