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尿酸(UA)含量测试盒微量法

简要描述:尿酸(UA)含量测试盒微量法公司正在出售的产品:哥伦比亚CNA血琼脂 英文名称:哥伦比亚血琼脂 产品规格:250g 改良胰蛋白胨大豆肉汤培养基(mTSB) 英文名称: 产品规格:250g 萘啶酮酸2.25mg 英文名称: 产品规格:2.25mg/支*5 胰蛋白胨大豆肉汤 英文名称: 产品规格:250g

  • 产品型号:
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2023-12-28
  • 访  问  量:383

详细介绍

本试剂盒仅供研究使用公司实验室提供免费代测,54个工作日出结果,提供原始数据!

产品名称

规格

检测方法

货号

尿酸(UA)含量测试盒微量法

100管/96样

微量法

BK-01S6449

商品介绍:

测定意义:

UA是鸟类和爬行类动物的主要代谢产物,正常人体尿液中产物主要为尿素,含少量尿酸。此外,UA还是重要的抗氧化剂,能清除超氧化物,羟自由基等。体内UA生成量和排泄量不平衡会导致多种疾病的发生。例如,血中UA升高会引起痛风、肾功能损害和动脉硬化,相反UA降低会引起恶性贫血,在临床诊断上具有重要的意义。

测定原理:

尿酸酶能催化UA生成CO2H2O2H2O2 氧化中的Fe2+ 生成Fe3+ Fe3+进一步与酚和4-氨基缩合生成红色醌类化合物,在505nm下有特征吸收峰,测定反应体系505nm的吸收值,可计算尿酸的含量。

需自备的仪器和用品:

恒温水浴锅、可见分光光度计、微量石英比色皿和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体 100 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体 15 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。

试剂四:液体 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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实验结果判断我有妙招:

1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。

2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。

3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。

4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。

与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。

② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。

③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。

④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。

⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。

 

操作步骤:

1. 样品的准备:

a. 细胞样品的准备:收集细胞,用4 ℃或冰浴预冷的PBS 或生理盐水洗涤1-2遍。沉淀用预冷组织细胞裂解液4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4℃离心,取上清作为待测样品。

b. 组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后获取组织样品。按照每100mg加入500-1000ul组织细胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴匀浆( 可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器) 。随后匀浆液4 ℃离心,取上清作为待测样品。

d. 使用BCA蛋白浓度测定试剂盒(P1511)测定蛋白浓度。通常10-20ug蛋白的细胞或组织匀浆液样品中SOD平均活力约42个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考) 。每种样品准备20-100 ug蛋白量通常已经足够用于后续检测。

e. 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏通常需要稀释10-100 倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70 ℃冻存,但建议尽量当天完成测定。

2. 试剂盒的准备工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 参照下表,根据待检测样品(包括标准品) 数量,配制适量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

注意:由于酶溶液的用量较少且易沉降,必须注意在使用前先轻轻离心一下,然后适当混匀后再使用。

b. 反应启动工作液配制:将试剂盒提供的反应启动液 (40X) 溶解后混匀,按1μl 反应启动液(40X) 加入39μl SOD 检测缓冲液的比例进行稀释,即为反应启动工作液。4℃或冰浴保存,可当天使用,但建议尽量现配现用。

c. (可选做) SOD 标准品准备:需自备SOD标准品,用本试剂盒提供的稀释液将SOD标准品稀释至如下系列浓度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在随后的检测中可以各取20微升,参考样品进行检测。说明:为避免稀释后SOD酶活性的下降, SOD标准品宜现稀释现使用;本试剂盒对于SOD的检测并不需要SOD作为标准品,但可以使用SOD标准品作为阳性对照或作为对SOD活性定量的参考。

PH6.8盐缓冲液  500ml*20瓶

5000U 微球菌核酸 Micrococcal Nuclease  -20℃保存

250mL Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.0   Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.0   常温保存

10mL G钠盐溶液 Penicillin G Sodium Solution -20 ℃避光保存

2 ug pQCXIN pQCXIN 低温运输,-20℃保存

无盐胰胨水  20支

2 ug pCDF1-MCS2-EF1-copGFP pCDF1-MCS2-EF1-copGFP 低温运输,-20℃保存

100IU)和亚碲酸钾(1mg)混合液  1ml*5支/盒

25g L- 苹果酸 L(-)-Malic Acid 室温阴凉干燥保存

亚利桑那菌琼脂(SA) Salmonella Arizona Agar 100

5mL 角膜上皮细胞生长因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

尿酸(UA)含量测试盒微量法ELL3  神经生因子调控抑制蛋白抗体 规格: 0.2ml

MOG  髓鞘少树突胶质细胞糖蛋白抗体 规格: 0.1ml

MTM1/Myotubularin  肌微管素1抗体 规格: 0.2ml

PITX3  症因子3抗体(穿透素) 规格: 0.2ml

Proteasome 20S alpha 6  蛋白体PSMα6抗体 规格: 0.2ml

S100 alpha 2  S100A2抗体 规格: 0.2ml

CD19  CD19抗体 0.1ml

CD44v4  CD44V4抗体 规格: 0.1ml

SPINT2/HAI2/HGFA Inhibitor 2  肝细胞生因子激活抑制蛋白2抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-Guinea pig IgM/AP  碱性磷酸(AP)标记的兔抗豚鼠IgM 规格: 0.1ml

phospho-VAV1(Tyr160)  磷酸化鸟苷酸转换因子VAV1抗体 规格: 0.1ml

Annexin A9  膜粘连蛋白9抗体 规格: 0.2ml

 


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