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注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于2,建议将试剂二用蒸馏水稀释7倍后使用(10μl试剂二原液+60μl蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.8-2。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。
产品名称:脂质过氧化物(LPO)测试盒可见分光光度法
产品规格:50管/48样
检测方法:可见分光光度法
产品货号:BK-01S6412
产品分类:氧化与抗氧化系列
商品介绍:
测定意义: 脂质过氧化是动植物体内活性氧(ROS)氧化生物膜的过程,脂质过氧化物(LPO)是脂质过氧化过程的产物,即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成LPO,使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。因此,LPO常被作为机体氧化应激的一种指标,与某些疾病的病理过程,如肿瘤、化学中毒、感染、炎 症、自身免疫疾病、动脉粥样硬化(AS)及心脑血管疾病,以及衰老等生理过程密切相关。 测定原理: LPO在酸性条件下加热,产生小分子终产物MDA,MDA与硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在535nm有最大吸收峰。 需自备的仪器和用品: 分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本: 取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行 匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。 【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
| ② 细菌/细胞样本: 先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次); 12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。 【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10 4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。 |
实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
1瓶 HSC-T6细胞株 HSC-T6 低温运输和保存
Stuart运送培养基管 Stuart Transport Medium 20支/包
100mL Western印迹膜封膜液 (NC膜和PVDF膜) Western Blot Blocking Buffer 4℃保存
2 ug SD1211- 4 SD1211- 4 低温运输,-20℃保存
32次 终点显色法内毒素定量试剂盒 Chromogenic End-point TAL Kit 4℃避光保存
2 ug pFP93 pFP93 低温运输,-20℃保存
即用型无菌瓶装液体培养基
1瓶 AtT-20 [AtT20]细胞株 AtT-20 [AtT20] 低温运输和保存
改良马丁培养基颗粒 Martin Medium, Modified 300ml/袋*10
10次 5'-RACE试剂盒 5'-RACE Kit -20℃保存
100mL MOPSO Buffer,0.2M,pH7.0 MOPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常温保存
脂质过氧化物(LPO)测试盒可见分光光度法ATX2 脊髓小脑共济失调2型蛋白抗体 规格: 0.2ml
LASS6 寿相关基因lASS6抗体 规格: 0.2ml
CSP 环子孢子蛋白(约氏)抗体 规格: 1ml
C1orf67/DNAH14 1号染色体开放阅读框67抗体 规格: 0.2ml
TRP1/gp75 酪相关蛋白1抗体 规格: 0.2ml
phospho-P53(Ser376) 磷酸化瘤抑制基因P53抗体 规格: 0.1ml
GFOD2 葡萄糖果糖还原2抗体 规格: 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的羊抗兔IgG 规格: 0.1ml
C1orf103 1号染色体开放阅读框103抗体 规格: 0.2ml
BNIP3 促凋亡调节蛋白BNIP3抗体 规格: 0.1ml
Mouse Anti-human IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗人IgG 规格: 0.1ml
SAMDC S-苷蛋脱羧抗体 规格: 0.1ml
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