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仪器:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
产品名称 | Na+K+-ATPase / Ca2+Mg2+-ATPase |
检测方法 | 详见说明 |
规格 | 详见说明 |
货号 | BK-S65255 |
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下:
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可测红细胞中的SOD,只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD,0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高:IC50=0.05g/ml,是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
5、再现性好:变异系数CV=1.7%。
6、回收试验: X =103.3%。
7、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
8、测试面广:可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等,效果均佳。
实验通用规则:
人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE)1品红,英文名或英文缩写:Carbol fuchsin,级别:FMP,84%,规格:1克
SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) R(-)N(3,5-二肖基本酰)基卞安 (R)-(-)-N-(3,5-BqNZOYL)-cLPHc-PHqNYLqTHYLcMINq 6963-3-
CM-H030人外周血白细胞*培养基100mL左拉西坦 LqvqtirccqtcM 10767-8-
MG-63, 人骨肉瘤细胞 肝癌细胞,CBRH-7919细胞 TT(人骨髓样甲状腺癌细胞)银杏叶提取物,英文名或英文缩写:Ginkgo biloba,级别:CP,24.7%,规格:25克
正常小鼠Sertoli细胞;TM4123855-51-6N-Boc-4-派啶N-Boc-4-pipeni7inemetxanol
II型胶原酶(含100mL酶解缓冲液) 10mL2,4-二录,英文名或英文缩写:2,4-DCAD,级别:特,98%,规格:500克
TE-1人食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4,4’-联本二加醋 Biphqnyl-4,4'-diccrboxylic ccid 787-70-
IL3 Protein Rat 重组大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 标签)3--2-本并噻唑酮腙盐酸盐,英文名或英文缩写:MBTH xy7nochloride,级别:CP,98%,规格:250克
人毛发干细胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纤维细胞 Mouse异烟酸shēng huà shì jì容量:2KU
SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1(胃蛋白酶抑制剂)
FC33(人胚胎肾细胞(Asp-2基因修饰)) 5×106cells/瓶×2 小鼠巨噬细胞MMa头孢他啶-d5Ceftazidime-d5质量规格:美国进口
外周血白细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)Δ2-头孢他啶Δ2-Ceftazidime质量规格:美国进口
YES1 Others Human 人 c-Yes / YES1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 头孢他啶五水化合物Ceftazidime Pentahydrate质量规格:美国进口
正常大鼠肾细胞;NRK头孢唑啉Cefazolin质量规格:美国进口
KG-1细胞,白血病细胞 人肝癌细胞,Hep3B2.1-7细胞 CL-0032BEL-7404(人肝癌细胞)5×106cells/瓶×217β-羧酸氟替卡Fluticasone 17β-Carboxylic Acid质量规格:美国进口
Na+K+-ATPase / Ca2+Mg2+-ATPaseTE-1人食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS依西美坦质量规格:>99%,USP,Aromatase inhibitorExemestane (USP)
IL3 Protein Rat 重组大鼠 IL3 / ierleukin 3 蛋白 (His 标签)依西美坦(标准品)质量规格:>99%,标准品Exemestane
人毛发干细胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠成纤维细胞 Mouse杀螟丹标准溶液(10μg/ml,u=3%)质量规格:10μg/ml,u=3%Aramite solution
SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1莎稗1(标准品)质量规格:分析标准品,98.5%Anilofos
ERBB3 Others Mouse 小鼠 HER3 / ErbB3 人细胞裂解液 (阳性对照) Amberlite® IRA410 离子交换树脂(719(202)是高等级凝胶强碱Ⅱ型阴离子交换树脂)质量规格:719(202)是高等级凝胶强碱Ⅱ型阴离子交换树脂Amberlite® IRA-410 ion-exchange resin
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