细胞色素C氧化酶COX活性测定试剂盒

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仪器：
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪（比色测定波长为550nm）
2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理：
血清（浆）可直接测定。
红细胞：需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本：可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液，离心取上清测定。
培养细胞、细菌、植物组织：常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理：参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

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测定步骤：
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样，不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.加温
1.加标本后和加结合物后，应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发，板上应加盖，或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后，反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃，ELISA板可避光放在实验台上，以便 不时观察，待对照管显色适当时，即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤，但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅，在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果，准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
优点如下：
1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。
2、取样量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可测红细胞中的SOD，只需2ml静脉血可测白细胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右组织就可测组织匀浆、胞浆中的SOD，0.2g组织可测线粒体及微粒体中的SOD。
3、灵敏度高：IC50=0.05g/ml，是邻苯三酚法的18倍。
4、稳定性好：试剂盒2～8℃存放6个月有效。
5、再现性好：变异系数CV=1.7%。
6、回收试验： X =103.3%。
7、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
8、测试面广：可测动物血液、组织、各种体液、灌流液等、各种培养细胞、细菌、植物组织、各种水产以及化妆品、保健品等，效果均佳。
Sars结构蛋白表达株;293 001B 人肾系膜细胞*培养基 100mL泛酸测定培养基shēng huà shì jì容量：50张/盒

人表皮色素细胞-深色素RNAHEM-d miRNA5 μg肖醋 CHROMIUM(III) nitncTq NONcHYDRcTq 7789--8

小鼠脑膜细胞(MMC)(5×105)聚乙二醇 8000 Poly(ethylene glycol) 8,000 (PEG 8000) 25322-68-3 250G 通用试剂

绵羊肺细胞;OAR-L1大黄根酸shēng huà shì jì容量：100克

小鼠Lewis肺癌瘤株;LLT 小鼠前脂肪细胞*培养基 100mLD-Glucose-6-PhosphateNa2 100mg/500mg/1g/5g Sigma G7250
CM-H024人胰腺星状细胞*培养基100mL三乙醇盐酸盐，英文名或英文缩写：Triethanolamine xy7nochloride，级别：CP，规格：100克

615小鼠癌瘤株;Ca759 小鼠卵巢上皮细胞*培养基 100mL Bis(tributyltin) oxidq 26-32-9

细胞名称 种属呋酸，英文名或英文缩写：Furoic acid，级别：BR，规格：5克

EPHA4 Others Mouse 小鼠 EPHA4 / HEK8 人细胞裂解液 (阳性对照) FLUORESCENTSPRINTGEL10%荧光SPRINT NEXT 胶, 10%蛋白组学级100mlRT

SV40T转化的人胚肾细胞;293T(聚乙二醇400)
DLL1 Others Human 人 DLL1 / Delta-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 索非那新琥珀酸盐Solifenacin succinate质量规格：>98%,BR

豚鼠皮肤细胞;GP-S2结晶紫Crystal violet质量规格：BS

NRP1 Others Cynomolgus 食蟹猴 Neuropilin-1 / NRP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 结晶紫(进口)Crystal violet质量规格：用于生化研究,进口

脑动脉血管内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)硝基四唑紫(INT)Iodonitrotetrazolium chloride(INT)质量规格：>98%,BR

293T细胞，人胚肾T细胞 人卵巢癌细胞,HO-8910细胞 人心肌细胞裂解物HCML乙基紫Ethyl Violet质量规格：80%,进分
细胞色素C氧化酶COX活性测定试剂盒615小鼠癌瘤株;Ca759 小鼠卵巢上皮细胞*培养基 100mL2,5-己二酮(分析标准品,≥99.5%(GC))质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)2,5-Hexanedione

细胞名称 种属3',3'',5',5''-四溴酚酞乙酯(80%,用于显微镜)质量规格：80%,用于显微镜3',3'',5',5''-Tetrabromophenolphthaleinethyl ester

EPHA4 Others Mouse 小鼠 EPHA4 / HEK8 人细胞裂解液 (阳性对照) 三十烷醇(>98%,植物激素级)质量规格：>98%,植物激素级Triacontanol

SV40T转化的人胚肾细胞;293T4-羟基苯(>98.0%，BR)质量规格：>98.0%，BR4-Hydroxybenzaldehyde

MET Others Human 人 c-MET / HGFR (aa 956-1390) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 低内牛血清白蛋白质量规格：>97%,Biotech GradeAlbumin, from bovine pH 7.0 Low endotoxin
实验通用规则：
1、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
2、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
3、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。
4、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。
5、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。
6、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。
7、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。
8、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加*。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
9、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。
10、底物是光敏感的，要在临用前现配。